大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞誘導(dǎo)分化為視網(wǎng)膜光感受器樣細(xì)胞的研究.pdf

1、福建醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞誘導(dǎo)分化為視網(wǎng)膜光感受器樣細(xì)胞的研究姓名：陳金國申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：碩士專業(yè)：眼科學(xué)指導(dǎo)教師：徐國興20100501D i f f e r e n t i a t i o n o f r a t b o n e m a r r o w m e s e n c h y m a l s t e mc e l l si n t op h o t o r e c e p t o r s i nv i t r

2、 oP o s t g r a d u a t e ：C h e n j i n —g u oT u t o t ：X u G u o - x i n g P r o f ．[ A b s t r a c t ]A I M ：T o f i n da t e c h n i q u ey i e d st h e h i g h e s t p e r c e n t o f s t r u c t u r a l l yw e l l

3、p r e s e r v e d c e l l si nv i t r o ．T oi s o l a t ea n d c u l t u r er a tm e s e n c h y m a ls t e mc e l l s ( R M S C s ) a n di n d u c e t h e mt od i f f e r e n t i a t ei n t op h o t o r e c e p t o r c

4、e l l s i n tv i t r o ．M E T H O D S ：P h o t o r e c e p t o r c e l l sf r o ma d u l tr a tr e t i n a sw e r ei s o l a t e da n dq u a n t i f i e du s i n ge n z y m a t i c d i s s o c i a t i o nw i t h o u t c

5、e n t r i f u g a t i o n ．r M S C sw e r e i s o l a t e da n d a t t a c h e dt o t h ew a l lo fc u l t u r e d i s h e sb yt h e i rs p e c i f i ca d h e r e n t a b i l i t y ．T h e n t h ec e l l sw e r ec h a r a

6、 c t e r i z e db yf l o wc y t o m e t r y ．r M S C s w e r ei n d u c e d b ys u p e r n a t a n to fr e t i n a lc e l lf o r1 4d a y si nv i t r o ．T h e nw e u s e di m m u n o c y t o c h e m i s t r ys t a i n i n

7、 ga n d R T - P C R t o s e ew h e t h e r t h e yc o u l d e x p r e s s r h o d o p s i n ，N S Ea n d G F A P ．R E S U L T S ：A ne n z y m a t i ct e c h n i q u ey i e l d e dt h eh i g h e s tn u m b e r o f i n t a

8、c t e l o n g a t e dp h o t o r e c e p t o r sr i g h ta f t e r d i s s o c i a t i o n ．M a n yR M S C s ，w h i c h w e r eh i g h l yp u r i f i e d ，w e r eo b t a i n e d a f t e r i n d u c t i o nb ys u p e r n

9、a t a n to fr e t i n a l c e l l ，3 5 ．1 ％±6 ．2 ％R M S C se x p r e s s e dr h o d o p s i m ，3 3 ．6 ％±4 ．0 ％R M S C se x p r e s s e dN S E ．9 ．6 ％±1 ．5 ％R M S C se x p r e s s e dG F A P ．I nt h ec o n

10、t r o l s ，n o n eR M S C s e x p r e s s e d r h o d o p s i m ，1 0 ．6 ％±5 ．O ％R M S C s e x p r e s s e d N S E ．1 3 ．7 ％±3 ．0 ％r M S C se x p r e s s e d G F A P ．C O N C L U S I O N ：T h e c u r r e n ts t

11、u d yd e m o n s t r a t e dt h ei m p o r t a n c e o fp r o p e ri s o l a t i o nt e c h n i q u e s t o o b t a i n t h e m a x i m u ma m o u n t o f i n t a c t p h o t o r e c e p t o r s c e l l s ．T h ei m p o r