中藥艾迪對異環(huán)磷酰胺在兔體內(nèi)代謝影響的研究.pdf

1、[目的]：研究異環(huán)磷酰胺(ifosfamide，IFO)在兔體內(nèi)的藥代動力學(xué)，了解中藥艾迪與IFO聯(lián)合應(yīng)用對其代謝有無影響，為臨床合理用藥的安全性和有效性提供參考依據(jù)。 [方法]：1、建立兔體內(nèi)IFO代謝模型：將6只家兔分成對照組和實(shí)驗(yàn)組，對照組給IFO和生理鹽水，實(shí)驗(yàn)組給IFO和艾迪。停藥3周后，進(jìn)行交叉實(shí)驗(yàn)，方法同上。將人的用藥量換算成兔的用藥量，予耳緣靜脈注射；在給藥后5、10、20、30、45min及1、1.5、2、2.

2、5、3、5、7h取兔耳血1mL。 2、血樣處理：采用CLeanert ODS C18(封端，100mg·mL-1)固相萃取小柱處理血樣。包括以下步驟(1)活化：先用2mL乙腈，再用2mL生理鹽水淋洗柱子；(2)上樣：將內(nèi)標(biāo)12.5μL加入0.5mL血清樣品，然后加樣；(3)淋洗：待血樣完全流出后，先加入1mL生理鹽水沖洗，再用1mL5％乙腈進(jìn)一步?jīng)_洗雜質(zhì)；(4)洗脫：用0.5mL60％乙腈洗脫，收集洗脫液，取20μL進(jìn)樣測定。3

3、、高效液相測定IFO藥物濃度方法的色譜條件：色譜柱：Zorbox-ODS C18(4.6mm×250mm，5μm);柱溫：室溫；流動相為乙腈-水(25:75)，流速1mL·min1;檢測波長200nm，以環(huán)磷酰胺為內(nèi)標(biāo)。4、實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)的處理：將測得的濃度及時間，通過3p97程序擬合最佳房室模型，繼而計算藥動學(xué)參數(shù)。將相應(yīng)的藥動學(xué)參數(shù)用SPSS13.0軟件處理，計量資料均以均數(shù)標(biāo)準(zhǔn)差(-x±s)表示，并進(jìn)行兩周期交叉設(shè)計的方差分析及雙單側(cè)t

4、檢驗(yàn)。最后，根據(jù)上述結(jié)果進(jìn)行兩組IFO生物等效性比較和研究。 [結(jié)果]：1、IFO在2.5～200μg·mL-1(γ=0.9999)濃度范圍內(nèi)線性良好；最低檢測限為0.5μg·mL-1(S/N=3)；日內(nèi)、日間精密度(RSD)均小于5％;血清樣品用C18固體萃取小柱處理后，高、中、低3個濃度的提取回收率在89.3％-93.6％之間。2、將測定的濃度經(jīng)3p97處理，推算二組均最符合二室房室模型。測定藥動力學(xué)參數(shù)為對照組：tα/2=

5、0.44±0.12h，tβ/2=5.32+3.09h, k21=0.25±0.43h-1, k10=1.21±0.40h-1, k12=0.39±0.50h-1, V=1.44±0.25L, CL=1.66±0.81L·h-1,AUC0-∞=140.53±39.26mg·L-1·h,AUC0-t=128.37±34.26mg·L-1·h；實(shí)驗(yàn)組：tα/2=0.35±0.21h,tβ/2=3.15±0.53h, k21=2.55±2.88

6、h-1, k10=1.44±0.34h-1, k12=2.0±2.52h-1,V=1.39±0.35L,CL=1.96±0.56L·h-1,AUC0-∞=120.02±25.89mg·L-1·h,AUC0-t=119.18±25.51mg·L-1·h。3、實(shí)驗(yàn)組生物利用度顯著性小于對照組，兩組IFO為非生物等效。 [結(jié)論]：1、采用C18固體萃取小柱處理血樣法，提取回收率高，樣品處理簡單、快捷、準(zhǔn)確、無污染。建立的HPLC測定方