Ⅰ型膠原蛋白在胃癌、食管癌中高表達(dá)的研究.pdf

1、胃癌(Gastric cancer GC)是我國(guó)最常見(jiàn)的消化道腫瘤，其死亡率居各類惡性腫瘤之首。約為25.21/10萬(wàn)。因此，對(duì)于胃癌發(fā)病分子機(jī)制及相關(guān)治療的研究已成為醫(yī)學(xué)研究領(lǐng)域的重點(diǎn)之一。迄今為止，胃癌相關(guān)基因不但己被廣泛研究，而且已被部分應(yīng)用于對(duì)胃癌的診斷、治療和預(yù)后判斷。然而我們對(duì)胃癌的相關(guān)基因還不能完全明確，胃癌新的基因還需得到更加廣泛和深入的研究。為了探究胃癌中表達(dá)特異的基因，本課題利用熒光差異顯示技術(shù)篩選胃癌組織和癌旁組織

2、表達(dá)差異的基因并利用半定量PCR、定量PCR等方法進(jìn)行驗(yàn)證，得到了下列幾個(gè)方面的結(jié)果： 1)對(duì)胃癌組織和癌旁組織進(jìn)行了20個(gè)FDD-PCR反應(yīng)切取了3個(gè)差異片段。進(jìn)行PCR二次擴(kuò)增得到了穩(wěn)定的差異條帶2條。 2)對(duì)差異片段進(jìn)行克隆測(cè)序，克隆到了2個(gè)cDNA片段。它們的編號(hào)依次為w1(226bp)、W2(175bp)。在NCBI BLAST數(shù)據(jù)庫(kù)進(jìn)行同源性分析，結(jié)果顯示W(wǎng)1與人類膠原蛋白I型基因有100％的同源性， W2與

3、人類ribosomal proteinL15基因有100％的同源性。 3)對(duì)這w1的cDNA片段運(yùn)用熒光定量PCR進(jìn)行驗(yàn)證，結(jié)果表明顯著高于其所對(duì)應(yīng)的癌旁組織，并進(jìn)一步在食管癌中進(jìn)行驗(yàn)證，發(fā)現(xiàn)人類膠原蛋白Ⅰ型基因在食管癌組織中的表達(dá)量也顯著高于其相對(duì)應(yīng)的癌旁組織，且在食管癌較胃癌中表達(dá)更為顯著。 4)應(yīng)用熒光定量PCR技術(shù)對(duì)人類膠原蛋白Ⅰ型基因基因在五種腫瘤細(xì)胞中的表達(dá)量的不同進(jìn)行了探究。結(jié)果顯示，其在五種腫瘤細(xì)胞中的表