蛋白O-GIcNAc修飾在谷氨酰胺改善膿毒性休克大鼠血管反應(yīng)性中保護(hù)機(jī)制的研究.pdf

1、目的:觀察蛋白O-GlcNAc修飾在谷氨酰胺(Glutamine，Gln)改善膿毒性休克大鼠血管反應(yīng)性中的作用并探討其可能機(jī)制。
　　方法:健康雄性SD大鼠40只，體重250～300g，隨機(jī)分為5組(n=8)：S組：假手術(shù)組(僅行開(kāi)關(guān)腹)；C組：膿毒性休克組[行盲腸結(jié)扎穿孔(CLP)建立膿毒性休克模型]；G組：谷氨酰胺組(Gln，CLP前1h靜注0.75g/kg)；Q組：槲皮素組(Quercetin，CLP前1h腹腔注射0.4 g

2、/kg+Gln靜注0.75g/kg)；A組：四氧嘧啶組(Alloxan，CLP前1h腹腔注射90 mg/kg+Gln靜注0.75g/kg)。CLP后6h靜注去氧腎上腺素(PE，0.5-2.5μg/kg)，觀察各組大鼠平均動(dòng)脈壓(MAP)的增加百分比；測(cè)定血清亞硝酸鹽及硝酸鹽濃度(NO2-/NO3-)代表血清一氧化氮濃度。取大鼠胸主動(dòng)脈環(huán)行血管張力實(shí)驗(yàn)并計(jì)算各組PE的最大效應(yīng)(Emax)及半數(shù)有效濃度(EC50)。應(yīng)用Western bl

3、ot法檢測(cè)胸主動(dòng)脈中蛋白O-GlcNAc修飾、HSP70和i-NOS蛋白表達(dá)水平，RT-PCR法檢測(cè)i-NOS mRNA水平。
　　結(jié)果:靜脈注射PE后，C組大鼠MAP的最大增長(zhǎng)率(△MAP)較S組顯著降低(P<0.05)，Gln對(duì)其表現(xiàn)出一定改善作用(P<0.05)。Gln對(duì)休克大鼠△MAP的改善作用能夠被四氧嘧啶阻斷(P<0.05)，而槲皮素對(duì)其沒(méi)有影響。與S組相比，C組大鼠胸主動(dòng)脈環(huán)對(duì)PE反應(yīng)的Emax和EC50均受損害，G

4、ln對(duì)此損害有部分改善作用(P<0.05)。Gln對(duì)休克大鼠離體血管反應(yīng)性的改善作用能夠被四氧嘧啶及槲皮素阻斷(P<0.05)。G組胸主動(dòng)脈環(huán)中蛋白O-GlcNAc修飾和HSP70表達(dá)水平高于C組(P<0.05)，此兩者的表達(dá)可分別被四氧嘧啶及槲皮素抑制(P<0.05)。G組胸主動(dòng)脈環(huán)中i-NOS mRNA、蛋白表達(dá)量及血身清中NO2-/NO3-產(chǎn)量均較C組有顯著下降(P<0.05)，Gln的上述作用可被四氧嘧啶阻斷，而槲皮素對(duì)此沒(méi)有影