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1、目的:糖尿病視網(wǎng)膜病變(diabetic retinopathy,DR)是糖尿病最常見的并發(fā)癥之一,血-視網(wǎng)膜屏障損傷是DR早期典型病理改變。近年研究證實(shí)早期神經(jīng)病變?cè)贒R發(fā)生發(fā)展中也具有重要作用。以往研究表明中藥當(dāng)歸補(bǔ)血湯加味方能夠改善糖尿病大鼠的視網(wǎng)膜血管病變,但其是否也作用于視網(wǎng)膜神經(jīng)細(xì)胞尚不清楚,本研究旨在探索當(dāng)歸補(bǔ)血湯加味方是否對(duì)糖尿病視網(wǎng)膜病變?cè)缙谏窠?jīng)細(xì)胞損傷具有防治作用及其機(jī)制。
方法:使用鏈脲佐菌素(strep
2、tozotocin,STZ)腹腔注射的方法誘導(dǎo)SD大鼠糖尿病模型。大鼠分為正常對(duì)照組,糖尿病組,當(dāng)歸補(bǔ)血湯加味方治療組。給予大鼠當(dāng)歸補(bǔ)血湯加味方或生理鹽水灌胃20周(4克/千克天)后收取視網(wǎng)膜,經(jīng)固定、石蠟包埋、切片后,運(yùn)用蘇木精-伊紅染色法、免疫熒光、DNA斷裂的原位末端標(biāo)記(TUNEL)方法檢測(cè)視網(wǎng)膜結(jié)構(gòu)和各神經(jīng)層厚度變化、反應(yīng)性膠質(zhì)化(reactive gliosis)以及神經(jīng)節(jié)細(xì)胞凋亡等視網(wǎng)膜神經(jīng)改變。通過(guò)尾靜脈注射熒光標(biāo)記蛋白
3、的方法檢測(cè)視網(wǎng)膜血管滲漏。使用TBARS法、免疫熒光對(duì)氧化應(yīng)激標(biāo)志物丙二醛(MDA)及8-OHdG反映視網(wǎng)膜局部及全身氧化應(yīng)激程度。
結(jié)果:糖尿病大鼠視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞凋亡明顯增加,而當(dāng)歸補(bǔ)血湯加味方顯著減少視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞的凋亡。糖尿病導(dǎo)致大鼠視網(wǎng)膜內(nèi)核層(INL)、外核層(ONL)及內(nèi)叢狀層(IPL)的厚度顯著變薄,當(dāng)歸補(bǔ)血湯加味方可以有效糾正這一病理改變,并能緩解視網(wǎng)膜反應(yīng)性膠質(zhì)化。減輕糖尿病視網(wǎng)膜病變局部及全身氧化應(yīng)激水
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