Corilagin抑制照射后BV-2細(xì)胞炎癥因子表達(dá)的體外研究.pdf

1、【目的】：研究抗炎藥物Corilagin抑制放射引起小膠質(zhì)細(xì)胞（BV-2)炎癥反應(yīng)的作用及其防護(hù)的分子機(jī)制。
　　 【方法】：細(xì)胞抑制實(shí)驗(yàn)（MTT）檢測(cè)Corilagin對(duì)BV-2細(xì)胞抑制率；Corilagin預(yù)處理小膠質(zhì)細(xì)胞，12 h后以0和32Gy 2個(gè)放射劑量照射BV-2細(xì)胞，Real-timePCR檢測(cè)小膠質(zhì)細(xì)胞照射后不同時(shí)間點(diǎn)炎癥因子IL-1β、TNF-α表達(dá)水平；硝酸還原酶法檢測(cè)細(xì)胞上清液中一氧化氮（NO）的含量；W

2、estern-blot檢測(cè)各組細(xì)胞核轉(zhuǎn)錄因子NF-κB p65蛋白表達(dá)；激光共聚焦顯微鏡觀察各組細(xì)胞標(biāo)志物Iba-1的表達(dá)、NF-κB p65核轉(zhuǎn)位及Nemo的表達(dá)。
　　 【結(jié)果】：1~10μg/mL濃度范圍內(nèi)Corilagin對(duì)BV-2細(xì)胞增殖幾乎無(wú)影響；照射后小膠質(zhì)細(xì)胞表面標(biāo)志物Iba-1表達(dá)明顯，提示小膠質(zhì)細(xì)胞激活，且炎癥因子NO、TNF-α、IL-1β表達(dá)上調(diào)，而Corilagin（5μg/mL)可以顯著抑制上述炎癥因

3、子的表達(dá)（tIL-1β=6.341，P<0.001；tTNF-α=3.411，P<0.007；tNO=3.134，P<0.015)；照射后BV-2細(xì)胞內(nèi)核轉(zhuǎn)錄因子NF-κB p65從胞漿轉(zhuǎn)入胞核，免疫細(xì)胞化學(xué)進(jìn)一步提示照射后細(xì)胞內(nèi)活化蛋白Nemo表達(dá)增加，而IκB表達(dá)減少。
　　 Corilagin可抑制NF-κB活化蛋白Nemo，并顯著抑制NF-κB p65的轉(zhuǎn)位。
　　 【結(jié)論】：Corilagin可能通過(guò)抑制途徑照