去卵巢大鼠結(jié)膜及淚腺炎癥因子表達(dá)的研究.pdf

1、第一部分:去卵巢大鼠模型的建立和眼表評(píng)估
　　 目的:建立去卵巢大鼠模型，觀(guān)察性激素水平改變對(duì)大鼠眼表的影響。
　　 方法:健康雌性SD大鼠20只隨機(jī)分為兩組，實(shí)驗(yàn)組(n=10)摘除大鼠雙側(cè)卵巢，對(duì)照組(n=10)為未摘除卵巢的模擬手術(shù)組。摘除卵巢后3m時(shí)，放射免疫分析法分別檢測(cè)兩組大鼠血清雌二醇、睪酮含量。術(shù)前及術(shù)后第1m、2m、3m時(shí)兩組均行Schirmer(I)檢查、角膜熒光素鈉染色檢查進(jìn)行眼表評(píng)估。
　　

2、 結(jié)果:實(shí)驗(yàn)組大鼠去卵巢后第3m時(shí)，體內(nèi)雌二醇濃度低于對(duì)照組(t=-35.37,P＜0.05)，睪酮濃度低于對(duì)照組(t=-12.13,P＜0.05)。實(shí)驗(yàn)組大鼠術(shù)后第1m、第2m、第3m眼表Schirmer(I)檢查未見(jiàn)淚液分泌減少、角膜熒光素鈉染色與對(duì)照組比較無(wú)明顯差異(P＞0.05)。
　　 結(jié)論:大鼠去卵巢后第3m時(shí)體內(nèi)雌二醇、睪酮水平下降;大鼠去卵巢后觀(guān)察至第3m未見(jiàn)明顯臨床眼表?yè)p害。
　　 第二部分:去卵巢大鼠

3、結(jié)膜炎癥因子的表達(dá)
　　 目的:觀(guān)察IL-17A、IL-1β、IL-6、TNF-α等炎癥因子在去卵巢大鼠結(jié)膜中的表達(dá)。
　　 方法:健康雌性SD大鼠20只隨機(jī)分為兩組，實(shí)驗(yàn)組(n=10)摘除大鼠雙側(cè)卵巢，對(duì)照組(n=10)為未摘除卵巢的模擬手術(shù)組。于第3m時(shí)處死各組大鼠。取大鼠上方瞼裂遮蓋區(qū)之球結(jié)膜組織，HE染色觀(guān)察結(jié)膜上皮細(xì)胞形態(tài)，免疫組化染色法、Westernblot法檢測(cè)實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組結(jié)膜IL-17A、IL-1β、

4、IL-6、TNF-α的表達(dá)。
　　 結(jié)果:術(shù)后第3m時(shí)結(jié)膜HE染色見(jiàn)實(shí)驗(yàn)組結(jié)膜較對(duì)照組結(jié)膜上皮細(xì)胞層數(shù)增多，細(xì)胞排列紊亂，有角化趨勢(shì)。免疫組織化學(xué)法檢測(cè)結(jié)膜各炎癥因子表達(dá)量實(shí)驗(yàn)組均高于對(duì)照組(A值:IL-17A:t=8.22,P＜0.01、IL-1β:t=16.43，P＜0.01、IL-6:t=13.44,P＜0.01、TNF-α:t=16.26,P＜0.01）。Westernblot法檢測(cè)結(jié)膜各炎癥因子表達(dá)量實(shí)驗(yàn)組均高于對(duì)照組

5、(A值:IL-17A:t=19.41,P＜0.01、IL-1β:t=12.63,P＜0.01、IL-6:t=17.17,P＜0.01、TNF-α:t=15.19,P＜0.01)。
　　 結(jié)論:大鼠去卵巢后結(jié)膜可出現(xiàn)組織學(xué)改變，IL-17A、IL-1β、IL-6、TNF-α等炎癥因子的表達(dá)增加。
　　 第三部分:去卵巢大鼠淚腺炎癥因子的表達(dá)
　　 目的:觀(guān)察IL-17A、IL-1β、IL-6、TNF-α等炎癥因子在

6、去卵巢大鼠淚腺中的表達(dá)。
　　 方法:健康雌性SD大鼠20只隨機(jī)分為兩組，實(shí)驗(yàn)組(n=10)摘除大鼠雙側(cè)卵巢，對(duì)照組(n=10)為未摘除卵巢的模擬手術(shù)組。于第3m時(shí)處死各組大鼠。取大鼠眶外淚腺組織，HE染色觀(guān)察淚腺腺泡細(xì)胞形態(tài)學(xué)變化，免疫組化法和Westernblot法檢測(cè)實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組淚腺I(mǎi)L-17A、IL-1β、IL-6、TNF-α的表達(dá)。
　　 結(jié)果:淚腺HE染色見(jiàn)實(shí)驗(yàn)組淚腺腺泡萎縮，細(xì)胞大小不一、細(xì)胞內(nèi)酶原顆粒明

7、顯減少，細(xì)胞排列紊亂。免疫組織化學(xué)法檢測(cè)淚腺各炎癥因子表達(dá)量實(shí)驗(yàn)組均高于對(duì)照組(A值:IL-17A:t=11.71,P＜0.01、IL-1β:t=15.02,P＜0.01、IL-6:t=25.59,P＜0.01、TNF-α:t=14.44，P＜0.01)。Westernblot法檢測(cè)淚腺各炎癥因子表達(dá)量實(shí)驗(yàn)組均高于對(duì)照組(A值:IL-17A:t=25.82,P＜0.01、IL-1β:t=25.87,P＜0.01、IL-6:t=22.95