大鼠觸液核酸敏感離子通道3的分布及其在炎性痛條件下的表達.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、目的:通過觀察大鼠觸液核(Cerebrospinal fluid-contacting nucleus,CSF-contacting nucleus)中酸敏感離子通道3(Acid-sensing ion channel3,ASIC3)的分布、炎性痛條件下的表達,以及給予ASIC3特異性抑制劑后對大鼠炎性痛行為的影響,以證明觸液核中不僅存在ASIC3且可以通過其參與炎性痛的信息傳遞或調(diào)節(jié)作用,為觸液核通過腦-腦脊液環(huán)路參與痛覺傳導與調(diào)控提

2、供新的分子物質(zhì)依據(jù)。
  方法:實驗用成年雄性SD大鼠,分為完全弗氏佐劑致炎性痛組(CFA組)、生理鹽水對照組(Saline組)、ASIC3特異性抑制劑組(APETx2組)、抑制劑溶媒對照組(Vehicle組)和正常組(Normal組)。選擇von Frey纖維絲和熱輻射痛敏檢測儀,檢測機械縮足閡值(Mechanical withdrawal threshold,MWT)和熱縮足潛伏期(Thermal withdrawal lat

3、ency, TWL),觀察各組大鼠行為學變化。大鼠在處死前48小時側腦室注射特異性觸液神經(jīng)元定位示蹤劑霍亂毒素亞單位B耦聯(lián)辣根過氧化物酶復合物(Cholera toxin B conjugated to horseradish peroxidase,CB-HRP)標記觸液神經(jīng)元。采用免疫熒光化學雙重標記技術與激光共聚焦顯微鏡技術相結合,定位、鑒別和計數(shù)ASIC3在正常大鼠觸液核的分布及在炎性痛條件下的表達。用Image-Pro Plus

4、圖像計數(shù)軟件比較CB-HRP陽性、ASIC3陽性和CB-HRP/ASIC3雙標陽性神經(jīng)元細胞數(shù)量的變化。在炎性痛第3天,側腦室注射ASIC3特異性抑制劑APETx2,觀察大鼠痛行為的變化。
  結果:(1)正常大鼠觸液核內(nèi)有ASIC3陽性標記細胞分布,約占觸液核神經(jīng)元細胞總數(shù)的34.6%;(2)與術前和Saline組相比,炎性痛大鼠炎癥側后足術后第1天、3天和7天的MWT和TWL均明顯降低(P<0.01),差異有統(tǒng)計學意義;術后第

5、3天、7天CB-HRP/ASIC3雙標陽性細胞占CB-HRP陽性標記細胞總數(shù)分別為52.7%、40.6%,與正常組比較明顯增加(P<0.01),差異有統(tǒng)計學意義。(3)與Vehicle組相比,術后第3天側腦室注射ASIC3特異性抑制劑APETx2,外周炎癥引起的機械性痛覺超敏和熱痛覺過敏明顯減輕(P<0.01),差異有統(tǒng)計學意義。
  結論:正常大鼠觸液核有ASIC3分布,在炎性痛條件下表達上調(diào),給予抑制劑APETx2抑制觸液核內(nèi)

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