觸液核CaMK-IIα的分布及其在傷害性刺激條件下的表達(dá)變化研究.pdf

1、目的: 觀察鈣/鈣調(diào)蛋白依賴的蛋白激酶II（CaMK-Iiα）在大鼠腦實(shí)質(zhì)內(nèi)觸液核神經(jīng)元(CSF-CNs)及脊髓背角的分布及其在鞘內(nèi)注射神經(jīng)激肽-1受體激動(dòng)劑(Sar-SP)致傷害性刺激條件下的磷酸化表達(dá)變化，探討腦實(shí)質(zhì)內(nèi)觸液核與傷害性刺激的關(guān)系。
　　 方法: 采用可靠的大鼠側(cè)腦室注射CB-HRP方法示蹤標(biāo)記dCSF-CNs，48h后鞘內(nèi)注射Sar-SP(6.5nmol/10μl)造模，采用鞘內(nèi)注射CaMK-Iiα拮抗劑KN-

2、93 (10μM/10μl)，并以鞘內(nèi)注射人工腦脊液(artificial cerebrospinal fluid，aCSF)10μl作對(duì)照熱板法測(cè)定大鼠痛閾變化，以CB-HRP/pCaMK-Iiα雙重免疫組織化學(xué)染色法標(biāo)記、定位CaMK-Iiα在脊髓背角和觸液核內(nèi)的分布及其磷酸化表達(dá)。
　　 結(jié)果:
　　 1.正常條件下大鼠免疫組織化學(xué)標(biāo)記CB-HRP陽(yáng)性的兩個(gè)神經(jīng)細(xì)胞簇內(nèi)均可見(jiàn)CB-HRP/CaMK-Iiα雙重標(biāo)記細(xì)

3、胞；
　　 2.鞘內(nèi)注射Sar-SP后大鼠產(chǎn)生緊張性舔、咬,抓等傷害性刺激行為反應(yīng),熱板法大鼠痛閾明顯降低（P<0.01 vs aCSF組）；大鼠觸液核神經(jīng)元及脊髓背角pCaMK-Iiα陽(yáng)性神經(jīng)元計(jì)數(shù)明顯增多（P<0.01 vs aCSF組）；
　　 3.預(yù)先鞘內(nèi)注射CaMK-Iiα拮抗劑KN-93可部分抑制上述變化(P<0.01)。
　　 結(jié)論: 大鼠觸液核神經(jīng)元存在CaMK-Iiα的分布；鞘內(nèi)注射Sar-SP