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文檔簡介
1、目的:采用偽狂犬病毒(PRV)示蹤技術(shù)觀察大鼠胸腰髓在背側(cè)和腹側(cè)脊髓損傷作用下,排尿中樞神經(jīng)通路改變的差異
方法:采用清潔級雌性SD大鼠36只,隨機(jī)分為3組:non-SCI(12只)、SCIa(12只)和SCIb(12只)。所需動物模型應(yīng)用標(biāo)準(zhǔn)化脊髓損傷動物模型實(shí)驗(yàn)裝置來制備,確定T12~L1水平為損傷部位,假手術(shù)組(non-SCI)大鼠僅咬除脊突及椎板,不損傷脊髓。SCIa為腹側(cè)損傷組,SCIb為背側(cè)損傷組。脊髓損傷后,即刻
2、在non-SCI、SCIa和SCIb膀胱壁系膜區(qū)注射PRV,96小時后,采用改良的Tarlov分級評分、Ashworth肌張力評分、斜板實(shí)驗(yàn)及BBB評分對所實(shí)驗(yàn)動物的運(yùn)動功能進(jìn)行評價和判斷。96h后直接取材。應(yīng)用免疫組織化學(xué)方法顯示假手術(shù)組、背側(cè)脊髓損傷組和腹側(cè)脊髓損傷組的脊髓切片中PRV陽性神經(jīng)元。應(yīng)用Image-Pro?Plus6.0對各組切片進(jìn)行專業(yè)系統(tǒng)分析,記錄同一解剖部位的陽性細(xì)胞分布部位及數(shù)量,在不同的5個相同放大倍數(shù)的光鏡
3、視野內(nèi),計算各組切片陽性細(xì)胞所呈現(xiàn)出來的平均積分光密度(IOD)。
結(jié)果:1.Non-SCI、背側(cè)和腹側(cè)SCI大鼠PRV示蹤的時限性和分布相似;
2.背側(cè)和腹側(cè)脊髓損傷組大鼠Ashworth肌張力評分高于對照組(p<0.05);
3.背側(cè)和腹側(cè)脊髓損傷組大鼠改良的Tarlov分級評分、斜板實(shí)驗(yàn)及BBB評分均明顯低于對照組(p<0.05);
4.PRV跨神經(jīng)示蹤SCI后的脊髓組織經(jīng)免疫組化處理后,P
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