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1、目的:本研究在2001年開始研究CEDIA的方法學(xué),并于2002年成功構(gòu)建了一對編碼EA、ED的DNA質(zhì)粒,并通過GST融合蛋白方式得到了高效表達(dá),相關(guān)文章已發(fā)表于中華微生物免疫學(xué)雜志.B型鈉尿肽(BNP)分子量約3KD,正常人的血漿水平低于100pg/ml,因此我們設(shè)計了CEDIA法來檢測BNP,期望能成功建立具有獨立知識產(chǎn)權(quán)的國產(chǎn)化試劑,降低BNP檢測的成本,使BNP的檢測易于在國內(nèi)普及.結(jié)論:1.通過基因工程技術(shù)成功構(gòu)建了GST-
2、BNP的表達(dá)質(zhì)粒GST-BNP-pGEX-4T-2(GST-BNP質(zhì)粒),得到了高效表達(dá).2.制備的人BNP抗原,既具有免疫原性又具有反應(yīng)原性,能很好地解決酶免分析中的基本要素抗原(被檢測物)和相應(yīng)的抗體制備所需.3.制備的GST-BNP在PBS中-20℃保存時有很好的穩(wěn)定性,4℃時48小時內(nèi)也基本穩(wěn)定,該融合蛋白有可能成為BNP測定的質(zhì)控物和參考物質(zhì).4.通過基因工程技術(shù)即在DNA水平把待測分子BNP的cDNA插入ED的cDNA3'端
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