蛋白酪氨酸磷酸化調(diào)控玉米果穗不同部位種子活力差異的初步研究.pdf

1、種子是農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中最基本、最重要的生產(chǎn)資料。種子質(zhì)量的優(yōu)劣直接影響農(nóng)業(yè)生產(chǎn)，而種子活力是衡量種子播種質(zhì)量的指標(biāo)。高活力種子出苗快速整齊，抗逆性強，具有明顯的生長優(yōu)勢和生產(chǎn)潛力。因此，揭示種子活力差異的機制對于高活力種子生產(chǎn)、加工具有重要的理論指導(dǎo)意義和潛在的應(yīng)用價值，對于提高我國種業(yè)競爭力具有重要的現(xiàn)實意義。本實驗室前期研究已經(jīng)發(fā)現(xiàn)玉米果穗不同部位種子活力為中部＞基部＞頂部。本研究從蛋白磷酸激酶基因和磷酸化蛋白兩方面入手，對酪氨酸磷酸化調(diào)

2、控玉米果穗不同部位種子活力差異進行初步研究。主要研究結(jié)果如下：
　　1．通過對吸脹24h的鄭單958上部和中部種子SDS-PAGE單向電泳結(jié)合酪氨磷酸化抗體的Western blot實驗，發(fā)現(xiàn)吸脹24h種子蛋白分子量55-72KD范圍內(nèi)中部酪氨酸磷酸化蛋白表達量高于上部。
　　2.通過Western blot結(jié)合質(zhì)譜技術(shù)發(fā)現(xiàn)了上部沒有磷酸化而中部磷酸化了的蛋白P93805，對其進行KEGG通路分析發(fā)現(xiàn)P93805是糖酵解過程

3、中的關(guān)鍵酶葡萄糖磷酸變位酶，其磷酸化差異水平可能導(dǎo)致果穗上部和中部能量代謝差異，進而影響種子活力。
　　3.利用生物信息學(xué)軟件分析酪氨酸蛋白激酶基因GRMZM2G076423啟動子區(qū)順式作用元件，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，該啟動子區(qū)具有光應(yīng)答、低溫應(yīng)答、脅迫應(yīng)答、與發(fā)育及激素相關(guān)的調(diào)控結(jié)構(gòu)域。預(yù)測該基因編碼377個氨基酸，蛋白質(zhì)分子量為42.28 KD，理論等電點為7.12。進化分析結(jié)果表明：GRMZM2G076423編碼的蛋白與水稻中編碼酪氨酸