菠菜核苷二磷酸激酶Ⅲ cDNA的克隆及其在菠菜種籽發(fā)芽過程中的表達.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、該文根據(jù)菠菜NDPK一級結(jié)構(gòu)的保守性,運用RT-PCR、3'、5'RACE及分子克隆相關(guān)技術(shù),首次獲得了菠菜NDRKⅢ的全長cDNA序列并登錄GenBank（AY082428）.序列分析表明：NDRKⅢcDNA全長為957bp,編碼235個氨基酸,預(yù)測蛋白分子量為25.7kDa.與純化的NDPKⅢ成熟蛋白（分子量17.1kDa）,NDRKⅢ蛋白前體的N末端存在分子量為8.48kDa、由82氨基酸組成的信號肽.結(jié)合同源性比較,可以推測菠

2、菜NDPKⅢ定位于線粒體.比較發(fā)現(xiàn),菠菜NDPKⅢ與人、小鼠、擬南芥、大豆、菠菜NDPKⅠ、Ⅱ等已知的NDPK有相當(dāng)高的同源性（最高達89.9﹪）.進一步運用半定量RT-PCR等方法,考察NDPKⅢ在菠菜種籽發(fā)芽中的表達,結(jié)果顯示：在缺乏光照的條件下,菠菜子葉中NDPKⅠ、Ⅱ、Ⅲ的表達均呈現(xiàn)隨時間先增加后降低的趨勢;有光照條件下,NDPKⅢ表達量沒有明顯變化,而NDPKⅠ、Ⅱ表達量均呈下降趨勢.該實驗為明確菠菜NDRKⅢ的結(jié)構(gòu)與功能提供

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