Genistein抑制缺氧誘導(dǎo)的ARPE-19細(xì)胞VEGF產(chǎn)生的機(jī)理的初步研究.pdf

1、 本研究主要觀察缺氧對(duì)RPE細(xì)胞增殖的影響和對(duì)VEGF表達(dá)的誘導(dǎo)作用，以及Gen對(duì)VEGFmRNA和蛋白表達(dá)的抑制作用，初步探討Gen對(duì)缺氧誘導(dǎo)的VEGFmRNA和蛋白表達(dá)的抑制作用的機(jī)制。 研究對(duì)體外培養(yǎng)的ARPE-19細(xì)胞缺氧(5﹪CO2/95﹪N2)2，12，24，36小時(shí)，MTT法檢測(cè)缺氧對(duì)細(xì)胞增殖的影響，用半定量逆轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈反應(yīng)(RT-PCR)法檢測(cè)缺氧后ARPE-19細(xì)胞VEGFmRNA的表達(dá)。用不同濃度的

2、Genistein，PD98059和TyrphostinA25預(yù)處理后的RPE細(xì)胞缺氧2小時(shí)和24小時(shí)，用RT-PCR法檢測(cè)VEGFmRNA表達(dá)，用酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)(ELISA)法檢測(cè)細(xì)胞培養(yǎng)上清中的VEGF蛋白表達(dá)。 結(jié)論為缺氧可以促進(jìn)RPE細(xì)胞增殖和VEGFmRNA表達(dá)增加。Gen可抑制缺氧誘導(dǎo)的ARPE-19細(xì)胞VEGF表達(dá)，并可能是通過(guò)抑制p42/p44MAPK途徑和HIF-1途徑共同抑制VEGF的產(chǎn)生，提示Gen對(duì)視網(wǎng)