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文檔簡介
1、目的:
1.檢測人眼眶橫紋肌肉瘤(rhabdomyosarcoma,RMS)組織中l(wèi)egumain的表達,觀察legumain的表達與RMS生物學行為之間的關系。并對橫紋肌肉瘤患者的多個臨床指標與患者預后進行多因素分析,對影響生存率的獨立因素進行分析討論。
2.檢測經(jīng)不同濃度的轉化生長因子β(transforming growth factorβ,TGF-β)刺激之后人胚胎型RMS細胞系RD細胞中l(wèi)eguma
2、in及α-平滑肌肌動蛋白(α-smoothmuscle actin,α-SMA)表達的變化,探討legumain在RD細胞中的作用,為腫瘤的治療提供新的思路和策略。
方法:
1.應用免疫組化SP法檢測56例人眼眶RMS患者手術標本中l(wèi)egumain的表達,并引入年齡、性別、組織學類型、腫瘤大小、是否累及眼瞼等因素進行統(tǒng)計學分析,觀察各因素與患者預后的關系。
2.首先利用細胞免疫熒光法檢測legu
3、main在RD細胞中的表達情況,并使用不同濃度的TGF-β對RD細胞進行刺激,通過RT-PCR以及Western-blot技術檢測刺激前后legumain及α-SMA在RD細胞中表達的變化。
結果:
1.legumain在56例RMS組織中有25例高表達,并且其表達高低、腫瘤大小、組織學類型、是否累及眼瞼等因素是影響橫紋肌肉瘤患者生存率的獨立臨床因素。
2.通過細胞免疫熒光法檢測到RD細胞中存在
4、legumain的表達,并且legumain及α-SMA的表達在2.5ng/ml的TGF-β刺激后較正常對照組明顯升高,而5ng/ml刺激后RD細胞中l(wèi)egumain及α-SMA的表達較正常對照組明顯降低。
結論:
1.legumain在RMS組織中具有較高的表達,檢測人眼眶RMS組織中l(wèi)egumain的表達有望成為判斷腫瘤惡性程度以及患者預后的生物學指標,并為以后臨床治療眼眶RMS提供實驗基礎。
5、 2.Legumian低表達、腫瘤≤5cm、胚胎型RMS、腫瘤未累及眼臉的病人均具有較高生存率。而患者的年齡、性別因素與患者的預后無關。
3.低濃度的TGF-β刺激提高了RD細胞中l(wèi)egumain及α-SMA的表達,而高濃度的TGF-β刺激降低了RD細胞中l(wèi)egumain及α-SMA的表達,由于低濃度的TGF-β可以促進RD細胞的生長,而高濃度的TGF-β可以通過某種途徑抑制RD細胞的生長,因此,legumain可能通過
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