Casticin對(duì)小細(xì)胞肺癌NCI-H446細(xì)胞系LCSCs自我更新及β-catenin表達(dá)的影響.pdf

1、目的:研究紫花牡荊素(Casticin)對(duì)人小細(xì)胞肺癌NCI-H446細(xì)胞系腫瘤干細(xì)胞樣細(xì)胞(Lung cancer stem like cells，LCSLCs)的自我更新能力及β-catenin表達(dá)的影響，初步探討紫花牡荊素抑制肺癌干細(xì)胞特性作用機(jī)制。
　　 方法:體外培養(yǎng)人肺癌NCI-H446細(xì)胞系，采用干細(xì)胞條件培養(yǎng)基懸浮培養(yǎng)法富集并得到肺癌球形成細(xì)胞，并鑒定作為L(zhǎng)CSLCs。腫瘤球形成試驗(yàn)檢測(cè)LCSLCs的自我更新能力

2、。Western blot分析NCI-H446細(xì)胞系腫瘤球形成細(xì)胞以及非分選細(xì)胞的干細(xì)胞生物標(biāo)志物CD133，CD44蛋白表達(dá)狀態(tài)。本文建立裸鼠皮下移植瘤模型來(lái)檢測(cè)人肺癌NCI-H446細(xì)胞系細(xì)胞和肺癌球形成細(xì)胞的裸鼠皮下成瘤的能力;并進(jìn)行移植瘤組織切片，HE染色，光學(xué)顯微鏡下檢測(cè)病理組織學(xué)形態(tài)。MTT法測(cè)定Casticin對(duì)LCSLCs增殖活性的影響。腫瘤球形成實(shí)驗(yàn)測(cè)定Casticin對(duì)LCSLCs自我更新的影響。Western bl

3、ot分析Casticin對(duì)LCSLCs的CD133和CD44蛋白表達(dá)的影響。Western blot分析對(duì)照檢測(cè)NCI-H446細(xì)胞系細(xì)胞與LCSLCs的β-catenin蛋白表達(dá)以及Casticin對(duì)β-catenin蛋白表達(dá)的影響。
　　 結(jié)果:1.在干細(xì)胞條件培養(yǎng)基懸浮培養(yǎng)中，人肺癌NCI-H446細(xì)胞系細(xì)胞成球生長(zhǎng)，形成肺癌球。2.腫瘤球形成試驗(yàn)結(jié)果表明人肺癌NCI-H446細(xì)胞系肺癌球形成細(xì)胞具有自我更新能力。3.與人

4、肺癌NCI-H446細(xì)胞系細(xì)胞相比，人肺癌NCI-H446細(xì)胞系肺癌球形成細(xì)胞干細(xì)胞標(biāo)志物CD133和CD44蛋白表達(dá)水平更高。4.裸鼠皮下成瘤實(shí)驗(yàn)證明了源自人肺癌NCI-H446細(xì)胞系肺癌球形成細(xì)胞具有高致瘤特性。5.Casticin優(yōu)先抑制LCSLCs細(xì)胞增殖活性。6.Casticin具有抑制LCSLCs自我更新作用。7.Casticin顯著下調(diào)干細(xì)胞標(biāo)志蛋白CD133和CD44的表達(dá)，呈劑量依賴性。8.人肺癌NCI-H446細(xì)胞系

5、肺癌球形成細(xì)胞高表達(dá)β-catenin蛋白，Casticin以劑量依賴方式抑制其β-catenin蛋白表達(dá)。
　　 結(jié)論:
　　 1.干細(xì)胞條件培養(yǎng)基懸浮培養(yǎng)得到的人小細(xì)胞肺癌NCI-H446細(xì)胞系肺癌球形成細(xì)胞具有肺癌干細(xì)胞特性。
　　 2.多甲氧基黃酮化合物Casticin具有抑制LCSLCs自我更新作用。
　　 3.Casticin抑制LCSLCs自我更新作用與其下調(diào)腫瘤干細(xì)胞信號(hào)分子β-caten