飼料中氨基糖苷類藥物檢測技術(shù)研究.pdf

1、本論文通過兩個(gè)試驗(yàn)，采用高效液相色譜(high performance liquid chromatogram，HPLC)技術(shù)研究建了飼料中卡那霉素A和新霉素的檢測方法。(1) 采用HPLC技術(shù)建立了飼料中卡那霉素A的檢測方法。用0.1 mol/L的鹽酸溶液提取飼料中的卡那霉素A，提取液以20000rpm的轉(zhuǎn)速高速離心，上清液經(jīng)復(fù)合陽離子(mixed mode cation exchanger，MCX)固相萃取(solid phase

2、extraction，SPE)小柱凈化，然后用5％氨水-甲醇溶液洗脫。洗脫液采用氮?dú)獯蹈?，用硼酸緩沖液溶解與鄰苯二甲醛(o-phthaladehyde，OPA)衍生液在室溫下反應(yīng)10 min，在反相XTerra<'TM>C<,18>柱分離。流動(dòng)相為醋酸銨緩沖液和乙腈(1:1，v/v)，等度洗脫，檢測器選用熒光檢測器，激發(fā)波長為230nm，發(fā)射波長為389nn，運(yùn)行時(shí)間為20min。結(jié)果表明，以0.1 mol/L鹽酸溶液為提取液，經(jīng)SPE

3、d小柱凈化，卡那霉素A的分離效果較好，且沒有其它雜質(zhì)峰干擾。飼料中添加10～200 mg/kg卡那霉素A的平均回收率為98.4～106.0％，變異范圍為1.17～9.78％，線性范圍為0.1～10μg/mL，卡那霉素A在飼料中的檢出限為5mg/kg，定量限為10 mg/kg。(2)利用HPLC和SPE技術(shù)建立了飼料中新霉素的檢測方法。用0.1 mol/L的鹽酸溶液提取飼料中的新霉素，提取液經(jīng)20000 rpm離心后由SPE小柱凈化，用2

4、5％氨水-甲醇溶液洗脫，洗脫液用氮?dú)獯蹈?，然后用硼酸緩沖液溶解與9-芴基甲氧碳酰氯(9-fluorenylmethoxycarbonyl chloride，F(xiàn)MOC-Cl)衍生劑在室溫下反應(yīng)15 min，在反相xTerra<'TM> C<,18>柱分離。流動(dòng)相為水和乙腈，洗脫程序?yàn)樘荻认疵?。檢測器為熒光檢測器，激發(fā)波長為267 nm，發(fā)射波長為309 nm，運(yùn)行時(shí)間為30 min。經(jīng)過色譜條件的優(yōu)化和前處理?xiàng)l件的選擇，飼料中新霉素的分離