家族性肥厚型心肌病MYH7、MYBPC3基因突變的綜合研究.pdf

1、背景：肥厚型心肌病（HCM）是以心室壁心肌非對稱性肥厚為特征的特發(fā)性心肌疾病，是我國年輕人心源性猝死的首要原因，是一種常染色體顯性遺傳病，具有明顯的家族性，稱家族性肥厚型心肌病(FHCM)。目前在構(gòu)成心室壁心肌肌小節(jié)相關(guān)蛋白的十幾種基因如MYH7、MYBPC3等中，已發(fā)現(xiàn)400種以上不同類型的致病性基因突變，且與FHCM的發(fā)病相關(guān)。
　　 目的：在既往我們對FHCM致病基因研究的基礎(chǔ)上，對安徽漢族FHCM家系MYH7、MYBPC

2、3基因進(jìn)行進(jìn)一步篩查，發(fā)現(xiàn)了一些國內(nèi)尚未見報道的致病性基因突變，并討論了后者與FHCM發(fā)病的相互關(guān)系及機(jī)理等，以便為今后FHCM的診斷、分型和防治做出有意義的貢獻(xiàn)。
　　 方法：在對我科收集的6個無血緣關(guān)系的漢族家族性肥厚型心肌病家系進(jìn)行MYH7、MYBPC3篩選中，我們發(fā)現(xiàn)其中5個家系存在著相關(guān)外顯子突變，5個家系（成員共計56人）均來自安徽地區(qū)，5例先證者中3例為男性，2例為女性，年齡44-63歲。每例先證者的家系中均有超過

3、2人以上發(fā)病，5個家系中患者組總?cè)藬?shù)為16例。對照組為80例健康對照。按規(guī)定完整填寫臨床資料調(diào)查表及知情同意書。用碘化鉀法或蛋白酶K法常規(guī)提取外周靜脈血白細(xì)胞中的基因組DNA。根據(jù)文獻(xiàn)設(shè)計MYH7、MYBPC3基因相應(yīng)擴(kuò)增片段的引物。聚合酶鏈反應(yīng)（PCR）擴(kuò)增2組的基因組DNA，將擴(kuò)增產(chǎn)物按雙脫氧末端終止法直接進(jìn)行熒光自動測序，再對測序圖詳盡分析并與PUBMED所列的基因序列核對，以確定致病性突變位點及其與本病的關(guān)系，同時討論發(fā)病機(jī)理。

4、
　　 結(jié)果：在FHCM患者組中，用PCR擴(kuò)增產(chǎn)物直接測序法，可發(fā)現(xiàn)MYH7基因中存在突變⑴⑵⑶⑷⑸類突變，在MYBPC3基因中可發(fā)現(xiàn)⑹⑺⑻⑼⑽類突變；外顯子方面，在對5個家系的先證著篩查中發(fā)現(xiàn)4種突變，其中3個家系（A，B，C）中分別攜帶MYH7基因外顯子突變3種（Arg663His⑴，Arg723Gly⑷，Arg736Thr⑸），另外2家系 (D，E) 中同時攜帶1種MYBPC3基因外顯子突變（Val896Met⑼）。對陽性

5、結(jié)果者家系中其他患者篩查時發(fā)現(xiàn)同樣突變。5個家系中，每個家系均有一個主要的致病相關(guān)外顯子突變在代間遺傳并引起后代發(fā)病，而健康對照組同一位置測序時未見異常。因此認(rèn)MYH7、MYBPC3基因的上述外顯子突變（⑴⑷⑸⑼）可能也是安徽漢人肥厚性心肌病的家族遺傳性的主要致病性基因。另外，5家系中還伴有其他內(nèi)含子（⑵⑶⑹⑺⑻⑽）突變，后者可能對患者發(fā)病起協(xié)同作用。所有患者的FHCM診斷均符合本論文規(guī)定診斷標(biāo)準(zhǔn)。
　　 結(jié)論：1、肥厚型心肌病

6、患者M(jìn)YH7、MYBPC3突變?yōu)榘不諠h人最常見的突變基因 2、 MYH7基因中18號、20號外顯子突變可能是安徽地區(qū)FHCM的最常見突變位點之一；其中家系A(chǔ)的18號外顯子的Arg663His錯意突變家系外顯率100％，家族成員中有類似暈厥史。與既往研究相比，既有相似也有不同之處；家系B的20號外顯子突變Arg723Gly的家系中無明確猝死病史，與既往報道病例相比，該家系表型也具有外顯率高（100％）、臨床癥狀出現(xiàn)較早，進(jìn)展較快，易發(fā)生心