殼聚糖基復(fù)合膠束體系用于共負(fù)載吲哚菁綠與阿霉素的腫瘤光熱化療的研究.pdf

1、聯(lián)合療法是目前臨床上常用的腫瘤治療手段，將兩種不同的腫瘤治療方法結(jié)合，不僅能相互促進(jìn)、提高治療效果，還能削弱治療過程中產(chǎn)生的副作用的影響。其中，熱療與化療的聯(lián)合已得到廣泛的關(guān)注與研究，而近紅外光熱化療是該領(lǐng)域中重要的研究方向。在過去幾年中，該療法主要以納米金為近紅外光熱劑，但納米金的生物相容性和體內(nèi)清除過慢等缺陷限制了其在臨床上的應(yīng)用。有鑒于此，研究者們發(fā)展了具有良好生物相容性的近紅外光熱劑吲哚菁綠(ICG)作為納米金的替代物，但I(xiàn)CG

2、在生理介質(zhì)中易發(fā)生結(jié)構(gòu)轉(zhuǎn)變，需通過包載的方式提高它的穩(wěn)定性。因此，為了實(shí)現(xiàn)基于ICG的近紅外光熱化療，有必要構(gòu)建出一套具有良好生物相容性與生物可降解性的傳輸載體，能在負(fù)載ICG、穩(wěn)定ICG的結(jié)構(gòu)與性能的同時(shí)負(fù)載化療藥物。
　　 本文從天然生物大分子殼聚糖出發(fā)，采用一種新穎的合成方法，以油溶性較好的十二烷基磺酸鈉-N，N-二甲基殼聚糖(SDC)為中間產(chǎn)物，在溫和的條件下簡(jiǎn)單的將PCL偶聯(lián)到殼聚糖主鏈上，進(jìn)一步通過與碘甲烷的季胺化反

3、應(yīng)，制備得到結(jié)構(gòu)規(guī)整可調(diào)的季胺化殼聚糖.聚己內(nèi)酯(TMC-PCL)。該聚合物能在水中自組裝形成尺寸為30～50nm的球形膠束。以阿霉素(DOX)為抗腫瘤模型藥物，通過乳化法將其包載在TMC-PCL膠束的疏水內(nèi)核中，研究了DOX的釋放行為，發(fā)現(xiàn)DOX的釋放具有明顯的pH響應(yīng)性，當(dāng)釋放介質(zhì)的pH從7.4降到5.0時(shí)，12h內(nèi)DOX的累積釋放量從35％提高到82％。以TMC-PCL為載體，通過靜電相互作用負(fù)載ICG，ICG經(jīng)負(fù)載后，它的光、熱

4、穩(wěn)定性以及光照升溫能力都有較大的改善。此外TMC-PCL膠束還表現(xiàn)出對(duì)ICG的良好的保留能力，ICG負(fù)載膠束在37℃，人體生理?xiàng)l件下保存48h后，ICG的滲漏量?jī)H為18.18％，遠(yuǎn)低于其他類似載體。進(jìn)一步以TMC-PCL膠束為載體，通過兩步法簡(jiǎn)便、高效地同時(shí)負(fù)載了DOX和ICG。用MTT法研究了DOX或ICG的單組份負(fù)載膠束和雙組份共負(fù)載膠束在近紅外光照或無光照的條件下對(duì)三種不同：DOX敏感性的腫瘤細(xì)胞Bcap-37、HepG2和MCF

5、-7/adr的細(xì)胞毒性。結(jié)果發(fā)現(xiàn)雙組份共負(fù)載膠束在808nm近紅外光輻照后，ICG的光熱效應(yīng)與DOX的抗腫瘤效果聯(lián)合作用，不僅大大提高了對(duì)腫瘤細(xì)胞的殺滅效果，還提升了腫瘤細(xì)胞對(duì)DOX的敏感性，并在一定程度上克服了MCF-7/adr細(xì)胞的多藥耐藥性。
　　 為了實(shí)現(xiàn)TMC-PCL膠束在生物體內(nèi)的長(zhǎng)循環(huán)，設(shè)計(jì)了一套腫瘤微環(huán)境弱酸性pH響應(yīng)的載體系統(tǒng)。將經(jīng)丁二酸酐接枝改性的殼聚糖-O-聚(寡聚乙二醇甲基丙烯酸酯)(SC-POEGMA)

6、與TMC-PCL膠束在中性條件下復(fù)合，SC-POEGMA通過靜電相互作用吸附到TMC-PCL膠束的陽離子化表面上，形成核-殼-冠三層復(fù)合膠束。通過改變丁二酸酐的接枝度，調(diào)節(jié)SC-POEGMA與TMC-PCL膠束的解復(fù)合的pH。以荷有肝腫瘤7721的裸鼠為模型，研究了不同解復(fù)合pH的復(fù)合膠束與未經(jīng)表面PEG化修飾的TMC-PCL膠束在裸鼠體內(nèi)的分布，發(fā)現(xiàn)復(fù)合膠束不僅有較長(zhǎng)的體循環(huán)時(shí)間，且解復(fù)合pH接近腫瘤微環(huán)境弱酸性pH的復(fù)合膠束比其他復(fù)