五甲基槲皮素對谷氨酸鈉誘導(dǎo)的代謝綜合征小鼠的作用研究.pdf

1、研究背景：代謝綜合征(MetS)是由于過度營養(yǎng)、坐視生活習(xí)慣以及遺傳等因素所導(dǎo)致的代謝性疾病癥候群。近年來,對MetS，尤其是對肥胖的機制及治療研究成為熱點，但典型的代謝綜合征動物模型的獲得，在一定程度上成為該研究的障礙。以槲皮素為代表的黃酮類化合物具有減肥、抗炎、降血糖、改善血脂異常、改善胰島素抵抗等多種生物學(xué)活性。這些作用，幾乎囊括了代謝綜合征的方方面面，極有可能在代謝綜合征的防治上發(fā)揮重要作用。五甲基槲皮素（PMQ）是將天然黃酮醇

2、類化合物槲皮素甲基化制得的半合成黃酮類化合物，具有明顯的藥代學(xué)優(yōu)點。
　　 本研究旨在①通過谷氨酸鈉干預(yù)（新生乳鼠）制備較為全面的代謝綜合征小鼠模型，并探索該模型在某些與肥胖高度相關(guān)的基因表達上的變化。②研究五甲基槲皮素在整體動物上（小鼠）的抗代謝綜合征作用。
　　 第一部分、谷氨酸鈉誘導(dǎo)的侏儒癥型代謝綜合征小鼠模型
　　 方法：谷氨酸鈉（MSG）或生理鹽水(Saline)處理的雌雄昆明種新生乳鼠，于21天齡分籠

3、，隨機分為生理鹽水處理+常規(guī)飼料組(Saline+RD)，谷氨酸鈉處理+常規(guī)飼料組（MSG+RD），生理鹽水處理+高脂飼料組（Saline+HFD），谷氨酸鈉處理+高脂飼料組(MSG+HFD)四組，每組18只。于14周齡時，各組小鼠進行口服糖耐量（n=6）及腹腔注射胰島素耐量(n=6)試驗。余下各組小鼠（n=6）繼續(xù)飼養(yǎng)至24周后，宰殺，檢測各組小鼠的血清血糖、甘油三脂、總膽固醇、高密度脂蛋白膽固醇、胰島素水平。用RT-PCR方法分析各

4、組小鼠肝臟、性腺脂肪組織中典型的脂肪細胞因子(Adiponectin、Leptin)，PPARs(PPARα、PPARβ/δ、PPARγ)及炎癥因子IL-6、TNF-αmRNA表達水平。另取MSG和Saline處理的雌雄小鼠（20周齡）各8只，進行成年小鼠生育能力試驗，觀察各組小鼠生育情況。
　　 結(jié)果：①谷氨酸鈉干預(yù)可致小鼠出現(xiàn)明顯的肥胖，表現(xiàn)為Lee指數(shù)的顯著增加。同時，伴隨著生長發(fā)育的抑制，表現(xiàn)為侏儒癥樣體型，且生育能力低

5、下。②谷氨酸鈉干預(yù)小鼠的血糖、甘油三脂、總膽固醇、胰島素均出現(xiàn)不同程度的升高，出現(xiàn)了胰島素抵抗，糖耐量受損，但同時也引起了高密度脂蛋白的升高。③RT-PCR檢測發(fā)現(xiàn)谷氨酸鈉干預(yù)小鼠肝臟及內(nèi)臟脂肪組織的部分代謝相關(guān)基因表達發(fā)生了不同程度的改變，包括：PPARγ、Leptin、IL-6、TNF-α表達上調(diào)；Adiponectin、PPARα、PPARβ/δ表達下調(diào)。
　　 結(jié)論：無論對于常規(guī)飼料還是高脂飼料，谷氨酸鈉干預(yù)均可引起小鼠

6、顯著性肥胖,致較全面的代謝綜合征模型，包括：向心性肥胖，高血糖，高脂血癥（TG），高膽固醇血癥，高胰島素血癥，胰島素抵抗，糖耐量受損，胰島素敏感性下降。同時，谷氨酸鈉還可引起生長發(fā)育廣泛性抑制，是理想的用于研究代謝綜合征及侏儒癥的小鼠模型。
　　 第二部分、五甲基槲皮素抗代謝綜合征作用
　　 方法：谷氨酸鈉（MSG）或生理鹽水(Saline)處理的雄性昆明種新生乳鼠，于21天齡分籠，適應(yīng)性喂養(yǎng)2周。第5周齡時，隨機分為生

7、理鹽水處理+溶劑組(Control，n=10)，谷氨酸鈉處理+溶劑組（Vehicle，n=10），谷氨酸鈉處理+羅格列酮5mg/kg組（Ros 5，n=10），谷氨酸鈉處理+五甲基槲皮素20mg/kg組（PMQ 20，n=9）。Ros 5組灌以5mg/kg/d的羅格列酮，PMQ 20灌以20mg/kg/d的五甲基槲皮素，Control組和Vehicle組灌以等體積的溶劑。灌喂至18周齡時，宰殺，檢測各組小鼠的的空腹血糖、甘油三酯、總膽固

8、醇、胰島素水平。器官及脂肪組織稱重、凍存，備測。
　　 結(jié)果：①PMQ 20mg/kg/d對于MetS小鼠具有顯著的減肥作用，與Vehicle組比較，表現(xiàn)為體重顯著降低，皮下脂肪及內(nèi)臟脂肪重量明顯的減少。羅格列酮5mg/kg/d表現(xiàn)出輕微的增加體重的趨勢。②PMQ 20mg/kg/d可改善MetS小鼠的糖脂代謝，其中，降血糖效果顯著，與羅格列酮5mg/kg/d作用相當。③PMQ 20mg/kg/d可顯著改善MetS小鼠的胰島素抵