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文檔簡介
1、我國作為一個養(yǎng)殖大國，飼料總產(chǎn)量位居世界第一。然而我國的特殊國情所致，其飼料資源相對匱乏，利用生物技術(shù)提高常規(guī)飼料的利用率，并且開發(fā)一些非常規(guī)性飼料用于拓寬飼料資源，將是極為重要的。近年來，內(nèi)切木聚糖酶已多被廣泛應用于飼料、制漿造紙和食品工業(yè)等，本研究基于木聚糖酶的重要價值和開發(fā)前景的廣闊性，成功地轉(zhuǎn)化了多拷貝木聚糖酶基因的枯草芽孢桿菌WB800N表達宿主，采用固體發(fā)酵的形式，外分泌出了內(nèi)切木聚糖酶，并且對該酶進行了初步的酶學性質(zhì)分析。
2、
整合載體pHT43/Spo0A是本試驗需要構(gòu)建的目的載體，是以pHT43質(zhì)粒為基礎，以Spo0A基因作為單交換的同源片段，利用限制性內(nèi)切酶位點Kpn I插入，得到整合載體pHT43/Spo0A。
研究發(fā)現(xiàn)，為了減少過載的外源高拷貝木聚糖酶基因?qū)λ拗鞯纳L代謝的影響，人工將xynT基因內(nèi)的碳水化合物結(jié)合區(qū)敲除，經(jīng)過亞克隆，成功構(gòu)建單拷貝載體。利用Xho I與Sal I作為同尾酶的特性，成功構(gòu)建了一個包含三拷貝串聯(lián)表達
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