ROCK-I基因表達(dá)下調(diào)及其對血管平滑肌細(xì)胞遷移的抑制作用.pdf

1、目的：心腦血管疾病已成為威脅人類生命的重要疾病之一。血管平滑肌細(xì)胞(vascular smooth muscle cell，VSMC)的增生和遷移，是許多心腦血管疾病發(fā)生的重要因素之一。Rho/Rho激酶介導(dǎo)的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路參與了眾多血管生理功能的調(diào)節(jié)，如細(xì)胞骨架重組，平滑肌收縮，細(xì)胞增生、黏附、遷移以及其他炎癥反應(yīng)過程，而這些細(xì)胞功能又與許多血管疾病的發(fā)生發(fā)展密切相關(guān)[1]。 本研究擬采用RNA干擾技術(shù)，對ROCK-I基因表達(dá)進(jìn)

2、行下調(diào)，研究ROCK-I基因與血管平滑肌細(xì)胞遷移的關(guān)系。為進(jìn)一步研究Rho激酶與血管平滑肌細(xì)胞遷移的分子機(jī)制提供實驗依據(jù)。 方法：根據(jù)大鼠ROCK-I基因參考序列設(shè)計合成siRNA，通過實驗篩選出有效的siRNA，然后通過脂質(zhì)體將ROCK-I的siRNA轉(zhuǎn)入A7r5細(xì)胞，對于轉(zhuǎn)染后的細(xì)胞進(jìn)行如下實驗：1．提取細(xì)胞的總RNA，然后做逆轉(zhuǎn)錄PCR，在基因水平上檢測ROCK-I基因表達(dá)下調(diào)的情況 2．提取細(xì)胞總蛋白，通過蛋白印跡技術(shù)，