白藜蘆醇抑制維生素D3和尼古丁誘導(dǎo)大鼠血管鈣化的作用及機制研究.pdf

1、背景:血管鈣化(vascular calcification)是動脈粥樣硬化、糖尿病、慢性腎病和老化的一種常見的并發(fā)癥和臨床特征，被認(rèn)為是心血管疾病發(fā)病率和死亡率的一個重要的危險因子，并認(rèn)為是預(yù)后的標(biāo)志。它以動脈壁的彈性降低和血液流動受阻為特點，并可能導(dǎo)致心臟病發(fā)作和中風(fēng)的發(fā)生。越來越多的證據(jù)表明，血管鈣化類似于骨的重塑，是一種主動調(diào)節(jié)，可以預(yù)防和可逆的細胞介導(dǎo)的過程，包括誘導(dǎo)和抑制兩個過程。白藜蘆醇(RSV)，是在植物如葡萄、桑椹、桉

2、樹和花生等中發(fā)現(xiàn)的天然存在的多酚類抗氧化物。大量證據(jù)表明，白藜蘆醇通過各種機制保護心血管系統(tǒng)，包括改善內(nèi)皮功能，降低心肌缺血再灌注損傷，促進血管舒張，抗炎，抗氧化，抗增殖，抗動脈粥樣硬化，抑制低密度脂蛋白修飾，抗血小板聚集，抗血栓形成和雌激素樣作用等。
　　目的:研究白藜蘆醇對血管鈣化大鼠血流動力學(xué)的影響;研究白藜蘆醇對血管鈣化大鼠的血清及主動脈堿性磷酸酶(ALP)活性，血清離子鈣水平，主動脈鈣含量和鈣沉積的影響;研究白藜蘆醇對血

3、管鈣化大鼠主動脈OPN、BMP-2和Cbfα-1在mRNA和蛋白水平表達的影響。
　　方法:
　　1.32只雄性Sprague-Dawley大鼠隨機分為4組(n=8):正常對照組（Con組）:給予等劑量生理鹽水和花生油處理;鈣化組(VDN組):給予維生素D3（300，000U/kg，肌注）和尼古丁(25mg/kg，溶于5ml花生油，灌胃)處理;VDN+RSV[L]組:在VDN組基礎(chǔ)上給予白藜蘆醇(25mg/kg/day)灌胃

4、;VDN+RSV[H]組:在VDN組基礎(chǔ)上給予白藜蘆醇(50mg/kg/day)灌胃。
　　2.使用多通道生理參數(shù)儀進行血流動力學(xué)參數(shù)的檢測;使用ALP活性檢測試劑盒或鈣濃度檢測試劑盒檢測血清和主動脈組織ALP活性，血清離子鈣水平和主動脈鈣含量;采用HE染色和Von Kossa染色檢測主動脈中膜彈力纖維結(jié)構(gòu)和鈣鹽沉積;采用反轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈反應(yīng)(RT-PCR)和Western blot方法檢測OPN、BMP-2和Cbfα-1在mRN

5、A和蛋白水平的表達。
　　結(jié)果:
　　1.與Con組比較，VDN組LVW/BW、HR、SBP、PP、MBP和LVSP均明顯升高，與VDN組比較，VDN+RSV[L]組的PP明顯降低，VDN+RSV[H]組的LVW/BW、SBP、PP、MBP和LVSP均明顯降低;與VDN+RSV[L]組比較，VDN+RSV[H]組SBP、PP和LVSP均明顯降低。
　　2.HE和Von Kossa染色顯示，與Con組比較，VDN組主動脈

6、管壁厚度增加，中膜彈力纖維排列紊亂，廣泛分布黑色銀染顆粒。與VDN組比較，VDN+RSV[L]和VDN+RSV[H]組主動脈管壁厚度減小，中膜彈力纖維排列紊亂程度減輕，黑色銀染顆粒減少。
　　3.與Con組比較，VDN組血清與主動脈ALP活性和主動脈鈣含量均明顯升高;與VDN組比較，VDN+RSV[L]和VDN+RSV[H]組血清與主動脈ALP活性和主動脈鈣含量，均明顯降低;與VDN+RSV[L]組比較，VDN+RSV[H]組血清

7、與主動脈ALP活性和主動脈鈣含量均明顯降低。
　　4.與Con組比較，VDN組OPN、BMP-2和Cbfα-1在mRNA和蛋白表達水平均明顯升高，與VDN組比較，VDN+RSV[L]和VDN+RSV[H]組OPN、BMP-2和Cbfα-1 mRNA和蛋白表達均明顯降低;與VDN+RSV[L]組比較，VDN+RSV[H]組BMP-2 mRNA和OPN蛋白表達水平均明顯降低。
　　結(jié)論:
　　1.白藜蘆醇能夠降低血管鈣化大