雷公藤紅素對(duì)CIA小鼠骨髓微環(huán)境中RANKL表達(dá)的影響研究.pdf

1、目的：探討雷公藤紅素對(duì)膠原誘導(dǎo)關(guān)節(jié)炎模型鼠(Collagen-induced arthritis，CIA)中核因子-κb受體活化因子配體(Receptor Activator for Nuclear Factor-κ BLigand，RANKL)在骨髓微環(huán)境的變化影響。
　　方法：建立膠原誘導(dǎo)關(guān)節(jié)炎(CIA)小鼠模型，觀察高、中、低不同濃度Cel對(duì)CIA小鼠的治療作用及RANKL在骨髓微環(huán)境的影響。主要包括:1.通過(guò)構(gòu)建CIA小鼠

2、模型，觀察CIA小鼠發(fā)病過(guò)程;通過(guò)流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)正常期小鼠及CIA小鼠未發(fā)病期、發(fā)病前期、病情高峰期、病情緩解期骨髓微環(huán)境變化;通過(guò)提取正常期小鼠及CIA組小鼠未發(fā)病期、發(fā)病前期、病情高峰期、病情緩解期骨髓，加入不同濃度RANKL進(jìn)行原代骨髓破骨細(xì)胞誘導(dǎo)，探究不同時(shí)期CIA小鼠在不同時(shí)期骨髓向破骨細(xì)胞分化能力的改變;2.通過(guò)小鼠關(guān)節(jié)炎評(píng)分，觀察CIA組及高、中、低CIA+Cel組小鼠發(fā)病情況;通過(guò)流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)CIA組及高、中、低CIA

3、+Cel組小鼠骨髓微環(huán)境中的變化;通過(guò)提取CIA組小鼠及高、中、低CIA+Cel組骨髓，加入不同濃度RANKL進(jìn)行原代骨髓破骨細(xì)胞誘導(dǎo)，探究Cel對(duì)CIA小鼠骨髓破骨細(xì)胞分化影響。
　　結(jié)果：CIA小鼠于一次免疫后28天開(kāi)始陸續(xù)出現(xiàn)關(guān)節(jié)紅腫，直至一次免疫后35天達(dá)到高峰，病情高峰期約維持3-7天，此后關(guān)節(jié)紅腫陸續(xù)消退，直至一次免疫后60天CIA小鼠無(wú)明顯關(guān)節(jié)紅腫;骨髓流式細(xì)胞術(shù)結(jié)果表明，RANKL在發(fā)病前期在骨髓淋巴細(xì)胞群、T細(xì)胞

4、、B細(xì)胞、單核細(xì)胞表達(dá)比例達(dá)到最高，在病情高峰期及病情緩解期出現(xiàn)下降，在病情緩解期時(shí)，RANKL在漿細(xì)胞中比例上升;破骨細(xì)胞誘導(dǎo)結(jié)果表示，CIA模型鼠骨髓細(xì)胞在發(fā)病前期、病情高峰期、病情緩解期時(shí)可以在較低濃度RANKL條件下向破骨細(xì)胞分化。動(dòng)物模型關(guān)節(jié)炎評(píng)分顯示，高、中、低CIA+Cel組小鼠關(guān)節(jié)炎評(píng)分均低于CIA組;與CIA組相比，不同濃度Cel能均能降低RANKL在骨髓淋巴細(xì)胞、B細(xì)胞、T細(xì)胞中的表達(dá)。在CIA+Cel中劑量、高劑量

5、組小鼠骨髓中，RANKL在單核細(xì)胞的比例降低。CIA+Cel低劑量、中劑量組對(duì)RANKL在骨髓漿細(xì)胞中表達(dá)作用較小，但Cel高劑量組可以增加RANKL在骨髓粒細(xì)胞中的表達(dá)。
　　結(jié)論：⑴在CIA小鼠發(fā)病過(guò)程中，骨髓微環(huán)境改變的發(fā)生早于病情改變。RANKL主要在CIA小鼠骨髓淋巴群、T細(xì)胞、B細(xì)胞中比例明顯升高，暗示了類(lèi)風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎骨髓微環(huán)境的改變?cè)缬陉P(guān)節(jié)外表現(xiàn)。⑵Cel能夠在CIA小鼠發(fā)病前期降低RANKL在CIA小鼠骨髓淋巴細(xì)胞群