短喙-侏儒綜合征病鴨體內(nèi)鴨圓環(huán)病毒的檢測及全基因序列分析.pdf

1、自2014年下半年以來，山東、安徽、江蘇等地的櫻桃谷鴨流行一種以大舌、短喙、生長障礙為主要特征的新發(fā)疾病，該病主要引起雛鴨上下喙萎縮變短，舌頭外伸、腫脹，感染后期脛骨和翅骨易發(fā)生骨折，體重明顯低于健康鴨只，導(dǎo)致出欄合格率下降，造成較大的經(jīng)濟(jì)損失，經(jīng)陳少鶯等人的分離鑒定，確定該病病原為一種新型小鵝瘟病毒（NGPV）或GPV變異株。在用NGPV陽性樣品感染鴨只時，僅有少數(shù)鴨只可以復(fù)制出與自然病例類似的短喙癥狀，實驗室造病率較低，因此該病的發(fā)

2、生絕不僅僅是NGPV單獨造成的，還有其他致病因素參與其中，因本病有著與家禽圓環(huán)病毒相似的臨床癥狀，如鸚鵡喙羽病病毒常常導(dǎo)致患病的鸚鵡出現(xiàn)鳥喙變形、嚴(yán)重脫毛及體重減輕，鵝的圓環(huán)病毒引起機(jī)體的矮小綜合征，并且DuCV的免疫抑制使其與其他疾病具有較高的混合感染率，因此我們懷疑短喙-侏儒綜合征病鴨體內(nèi)協(xié)同感染了鴨圓環(huán)病毒。
　　為了解鴨圓環(huán)病毒在短喙侏儒綜合征發(fā)病鴨群中的流行變異情況以及危害程度，明確發(fā)病鴨群的的鴨圓環(huán)基因型及序列，為疾病

3、的防治提供依據(jù)，本實驗將完成以下研究內(nèi)容。
　　1.短喙侏儒綜合征發(fā)病鴨群中鴨圓環(huán)病毒的檢測
　　本試驗從山東、江蘇、安徽等地的24個鴨群的147只病死鴨中采取了心、肝、脾、肺、腎等8個組織器官，采用常規(guī)PCR方法對其進(jìn)行圓環(huán)病毒的檢測，結(jié)果顯示，DuCV陽性個體感染率達(dá)53.06％(78/147)，群體感染率為83.3%（20/24），對79只具有典型大舌短喙特征的鴨子進(jìn)行了DuCV和NGPV的共感染檢測，DuCV與NGP

4、V的混合感染率為53.16%（42/79）。
　　2.鴨圓環(huán)病毒的全基因測序及序列分析
　　篩選部分陽性樣品進(jìn)行全基因組擴(kuò)增共獲得4個全基因組序列，其中兩株基因組大小為1993nt，另兩株為1995nt，與已報道的其他毒株基因組大小一致。基因組內(nèi)包含3個主要的閱讀框，V1/rep、C1/cap和C2/ORF3，所得到4個毒株在上述編碼區(qū)均沒有插入或缺失現(xiàn)象存在。根據(jù)全基因序列以及兩個主要病毒蛋白核苷酸序列繪制的進(jìn)化樹也一致顯