LPS對(duì)母兔下丘腦、卵巢和輸卵管中TLR4、TLR2及其相關(guān)免疫細(xì)胞因子表達(dá)的影響.pdf

1、脂多糖(LPS)是革蘭氏陰性菌的細(xì)胞壁成分，是TLR4和TLR2的共同配體，同時(shí)也是病原分子相關(guān)模式物(PAMP)的典型代表。作為一種內(nèi)毒素，它能夠誘導(dǎo)機(jī)體產(chǎn)生與感染革蘭氏陰性菌相同的免疫應(yīng)激過(guò)程。本研究中采用耳緣靜脈注射一定量的LPS，模擬母兔自然狀態(tài)下感染革蘭氏陰性菌時(shí)的免疫應(yīng)激過(guò)程。旨在研究革蘭氏陰性菌感染對(duì)母兔下丘腦、卵巢和輸卵管中TLR4、TLR2以及其下游免疫細(xì)胞因子IL-1β、IL-6和TNF-α表達(dá)的影響。通過(guò)熒光定量P

2、CR檢測(cè)TLR4、TLR2、IL-1β、IL-6以及TNF-α的轉(zhuǎn)錄水平，利用ELISA檢測(cè)IL-1β、IL-6以及TNF-α的蛋白表達(dá)量。
　　熒光定量PCR結(jié)果顯示:下丘腦、卵巢和輸卵管中均有TLR4、TLR2、IL-1β、IL-6和TNF-α的轉(zhuǎn)錄，注射生理鹽水后TLR4各個(gè)時(shí)間點(diǎn)轉(zhuǎn)錄水平與0h相比差異不顯著（P＞0.05），TLR2在下丘腦中6h和輸卵管中3h顯著高于0h（P＜0.05），各個(gè)組織中1.5～12h，免疫細(xì)胞

3、因子的轉(zhuǎn)錄水平與0h相比沒(méi)有顯著變化（P＞0.05）;LPS誘導(dǎo)后，與0h相比TLR4轉(zhuǎn)錄水平僅在卵巢中顯著增加(P＜0.05)，在輸卵管中1.5h、3h和12h顯著低于0h(P＜0.05)，而TLR2轉(zhuǎn)錄水平在下丘腦中3h和卵巢中12h顯著高于0h（P＜0.05），IL-1β轉(zhuǎn)錄水平在下丘腦中1.5h、3h和12h，卵巢中1.5～12h和輸卵管中6h顯著高于0h(P＜0.05)，IL-6在下丘腦中1.5～12h，卵巢和輸卵管中1.5～

4、3h顯著高于0h（P＜0.05），TNF-α在下丘腦中1.5h、3h和12h，卵巢中1.5h和輸卵管中1.5～3h顯著高于0h(P＜0.05);實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組相比，TLR4轉(zhuǎn)錄水平僅在卵巢中12h顯著高于對(duì)照組(P＜0.05)，TLR2在下丘腦中3h顯著性高于對(duì)照組（P＜0.05），6h顯著低于對(duì)照組(P＜0.05)，卵巢中12h顯著高于對(duì)照組（P＜0.05），而輸卵管中3h顯著低于對(duì)照組（P＜0.05），IL-1β轉(zhuǎn)錄水平在注射后下丘

5、腦中1.5h、3h和12h，卵巢中3～12h和輸卵管中6h顯著高于對(duì)照組（P＜0.05），IL-6轉(zhuǎn)錄水平在下丘腦中1.5～12h，卵巢和輸卵管中1.5～3h顯著高于對(duì)照組(P＜0.05)，TNF-α轉(zhuǎn)錄水平在下丘腦中1.5h、3h和12h，卵巢中1.5h和輸卵管中1.5～3h顯著高于對(duì)照組(P＜0.05)。
　　ELISA檢測(cè)免疫細(xì)胞因子濃度顯示:下丘腦、卵巢和輸卵管中均有IL-1β、IL-6和TNF-α蛋白的表達(dá)，對(duì)照組中，I

6、L-1β和IL-6濃度在注射生理鹽水后各個(gè)組織中1.5～12h的表達(dá)與0h相比沒(méi)有顯著變化（P＞0.05），而在注射后TNF-α濃度在輸卵管中3～12h顯著低于0h（P＜0.05）;LPS誘導(dǎo)后，IL-1β濃度在下丘腦中1.5～12h，卵巢中1.5～6h，輸卵管中1.5h和6h顯著高于0h（P＜0.05），IL-6濃度在卵巢中3h和輸卵管中6h顯著高于0h（P＜0.05），TNF-α濃度在下丘腦中3～6h和輸卵管中1.5～12h顯著低于

7、0h(P＜0.05);實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組相比，IL-1β濃度在下丘腦中1.5～12h，卵巢中3～6h，輸卵管中1.5h和6h顯著高于對(duì)照組，IL-6濃度在下丘腦中12h，卵巢中3h，輸卵管中6h顯著高于對(duì)照組(P＜0.05)，TNF-α濃度在輸卵管中1.5h顯著低于對(duì)照組。
　　總體上說(shuō)下丘腦、卵巢和輸卵管中均有TLR4、TLR2的表達(dá)，但LPS誘導(dǎo)后，TLR4轉(zhuǎn)錄水平僅在卵巢中顯著增加（P＜0.05），TLR2轉(zhuǎn)錄水平在下丘腦和卵巢