馬爾尼菲青霉菌廣西竹鼠寄生株與臨床人分離株超微形態(tài)學及氧化形態(tài)特性的研究.pdf

1、目的:通過觀察雙相型馬爾尼菲青霉菌(PM)臨床人分離株及廣西銀星竹鼠寄生株超微結(jié)構(gòu)；以及體外用H202處理前后觀察PM超微結(jié)構(gòu)的變化，探討不同來源的PM菌株的形態(tài)學特征以及抵御氧化殺傷后超微結(jié)構(gòu)變化。 方法:臨床人分離株及廣西銀星竹鼠寄生株P(guān)M25℃和37℃兩種溫度培養(yǎng)7天，光學顯微鏡下觀察PM菌體特征及透射電子顯微鏡觀察PM超微結(jié)構(gòu)；以含過氧化氫的培養(yǎng)基對臨床人分離株及竹鼠寄生株P(guān)M25℃和37℃兩種溫度培養(yǎng)7天，觀察光學顯微

2、鏡下PM菌體特征及透射電子顯微鏡下PM超微結(jié)構(gòu)，觀察變化。 結(jié)果:①臨床人分離株及竹鼠寄生株P(guān)M正常情況下25℃生長均為菌絲相，有玫瑰紅色素產(chǎn)生，氣生菌絲、營養(yǎng)菌絲均豐富；37℃均為酵母型白色菌落，膜樣。加H2O2處理后，臨床人分離株及竹鼠寄生株P(guān)M菌絲相及酵母相生長速度均較正常時生長緩慢，25℃菌絲相色素產(chǎn)生均較正常時增加，其中竹鼠寄生株P(guān)M營養(yǎng)菌絲較氣生菌絲豐富，而臨床人分離株營養(yǎng)氣生菌絲無明顯差別；37℃I臨床人分離株及竹

3、鼠寄生株P(guān)M菌落外觀差別不明顯。②光鏡下，臨床人分離株及竹鼠寄生株P(guān)M正常生長時25℃均有分枝分隔菌絲，分生孢子梗、頂端單輪或雙輪帚狀枝；37℃同樣可見圓形、橢圓形、酵母樣細胞及關(guān)節(jié)孢子。加H202處理后，臨床人分離株在25℃培養(yǎng)時產(chǎn)孢減少，部份菌絲及帚狀枝變形，而竹鼠寄生株P(guān)M加H2O2后光學顯微鏡下未見有何差別；37℃人、竹鼠PM加H2O2后光學顯微鏡下見菌體皺縮。③透射電子顯微鏡觀察可見：正常情況下臨床人分離株及竹鼠寄生株P(guān)M25

4、℃均可見細胞壁光滑，細胞膜完整，胞質(zhì)內(nèi)可有細胞核，線粒體，內(nèi)質(zhì)網(wǎng)，脂質(zhì)體，大小不等的空泡等結(jié)構(gòu)；37℃除可見25℃所見細胞器外還可見微體結(jié)構(gòu)。H2O2處理后，兩菌株兩相溫度下透射電鏡均可見細胞壁不完整，局部有缺損，厚薄不均；細胞膜不連續(xù)，有皺縮及凸起；胞質(zhì)不均勻，吞噬現(xiàn)象明顯，線粒體(Mi)結(jié)構(gòu)改變，其中37℃與25℃相比仍可見較多微體結(jié)構(gòu)。其中臨床人分離株25℃細胞器結(jié)構(gòu)不清晰，37℃細胞核N無核膜，看到凋亡，變化均較竹鼠寄生株明顯。

5、 結(jié)論:①臨床人分離株及竹鼠寄生菌株P(guān)M，兩菌株間比較在雙相溫度下光鏡和電鏡觀察形態(tài)學無明顯差別。②兩菌株任一株菌雙相間有改變，電鏡下37℃酵母相見微體結(jié)構(gòu)而25℃菌絲相未觀察到。③過氧化氫作用后，兩菌株25℃生長均出現(xiàn)抑制，但玫瑰紅色素產(chǎn)生增加，超微結(jié)構(gòu)出現(xiàn)變化，細胞壁(CW)不完整，線粒體(Mi)變性；37℃見變性的線粒體，微體結(jié)構(gòu)，吞噬現(xiàn)象明顯。④PM在37℃有可能通過微體(Mb)溶解機體衰老細胞器形成吞噬泡以及調(diào)節(jié)線粒體