RANKL介導(dǎo)下頜功能性前伸后髁突骨改建的機(jī)制.pdf

1、目的:
　　 下頜骨髁突是整個(gè)下頜骨最為主要的生長區(qū)，其生長發(fā)育是通過下頜骨髁突的軟骨內(nèi)成骨來完成的。大量研究表明，骨骼的生長需要各種調(diào)節(jié)因子來共同調(diào)控，骨組織始終都在進(jìn)行新陳代謝，并且是具有重建功能的生物組織。當(dāng)骨組織所處的應(yīng)力環(huán)境發(fā)生改變，即所處的動態(tài)平衡被打破，骨組織會通過骨重建這一組織改建過程來進(jìn)行骨組織的骨量和骨質(zhì)的改變，在一個(gè)新的應(yīng)力環(huán)境下達(dá)到動態(tài)平衡。在Ⅱ類錯合的功能矯治中，下頜功能性前伸后，髁突部的骨改建是整個(gè)治

2、療成功的關(guān)鍵。在下頜骨髁突骨改建的過程中破骨細(xì)胞起著不可或缺的作用，RANKL是介導(dǎo)破骨細(xì)胞形成所必需的調(diào)控因子，RANKL表達(dá)的變化會影響破骨細(xì)胞的形成以及骨改建的完成。在以往的研究中，學(xué)者大多著眼于骨改建過程中成骨細(xì)胞在其中所起的作用而破骨細(xì)胞鮮有報(bào)道，因此，本實(shí)驗(yàn)通過研究功能性前伸下頜后，大鼠下頜骨髁突軟骨部RANKL的變化來進(jìn)一步探討RANKL及其介導(dǎo)形成的破骨細(xì)胞在髁突部骨改建中的機(jī)制。
　　 方法:
　　 選

3、擇4周齡健康Sprague-Dawley(SD)雄性大鼠，60只，體重90g左右，適應(yīng)性喂養(yǎng)一周后，將其按照隨機(jī)分組的方式分為實(shí)驗(yàn)組和對照組，每組30只。同時(shí)，實(shí)驗(yàn)組內(nèi)同樣按照隨機(jī)分組的方式分為6組每組5只，即A組，B組，C組，D組，E組，F(xiàn)組。對照組內(nèi)30只按照隨機(jī)分組方式分為6組，每組5只，即a組，b組，c組，d組，e組，f組。實(shí)驗(yàn)組大鼠全天24小時(shí)持續(xù)戴用矯治裝置，同時(shí)注意觀察配戴情況，若矯治裝置脫落或戴用情況不符合配戴要求則即刻

4、調(diào)整，重新消毒粘接，以保證每天的戴用時(shí)間。對照組不做處理，為自然生長組。按照實(shí)驗(yàn)預(yù)定時(shí)間即配戴矯治器后第一天，第三天，第七天，第十四天，第二十一天，第二十八天依次處死A、a組，B、b組，C、c組，D、d組，E、e組，F(xiàn)、f組大鼠，斷頸處死取材保存于4％多聚甲醛(PH=7.4)中固定24小時(shí)。而后放入10％EDTA中(PH=7.2)室溫脫鈣至標(biāo)本軟化。然后進(jìn)行切片，通過免疫組織化學(xué)染色應(yīng)用多功能真彩色細(xì)胞圖象分析管理系統(tǒng)檢測不同分組大鼠的

5、髁突軟骨后份RANKL表達(dá)變化。應(yīng)用SPSS13.0統(tǒng)計(jì)軟件對所有數(shù)據(jù)進(jìn)行處理，從而分析不同時(shí)間點(diǎn)RANKL在下頜骨髁突軟骨中表達(dá)的變化。
　　 結(jié)果:
　　 1、形態(tài)學(xué)變化
　　 實(shí)驗(yàn)組大鼠下頜骨位置在整個(gè)實(shí)驗(yàn)過程中一直處于適度前伸狀態(tài)，下頜位置以下頜切牙的位置為標(biāo)記，明顯向前下方向移動，前牙為對刃狀態(tài)，已不能后退，未見明顯的左右偏斜。
　　 2、RANKL免疫組化結(jié)果
　　 RANKL的陽性表

6、達(dá)顯示細(xì)胞膜被染為棕黃色。陽性細(xì)胞明顯區(qū)別于背景染色。RANKL在各層軟骨細(xì)胞上均可表達(dá)，主要表達(dá)在增殖層。對照組中RANKL的陽性表達(dá)強(qiáng)度逐漸降低，呈現(xiàn)出增齡性變化，實(shí)驗(yàn)組中RANKL的表達(dá)水平與對照組相比，實(shí)驗(yàn)組第一天RANKL的表達(dá)強(qiáng)度與其相應(yīng)的對照組相比無明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P＞0.05）。在第三天時(shí)實(shí)驗(yàn)組RANKL表達(dá)低于對照組(P＜0.05)，在實(shí)驗(yàn)的第七天，實(shí)驗(yàn)組RANKL的表達(dá)低于對照組，出現(xiàn)了表達(dá)水平的最低值(P＜0.05

7、)。第十四天時(shí)，實(shí)驗(yàn)組的RANKL表達(dá)與對照組相比仍處于低表達(dá)狀態(tài)，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)，但比第七天實(shí)驗(yàn)組RANKL的表達(dá)量增多，即RANKL表達(dá)量回升。實(shí)驗(yàn)的二十一天時(shí)，實(shí)驗(yàn)組RANKL的表達(dá)與對照組相比(P＜0.05)，統(tǒng)計(jì)學(xué)差異仍然存在，但與第十四天實(shí)驗(yàn)組RANKL的表達(dá)量相比較，其表達(dá)量繼續(xù)回升。第二十八天時(shí)實(shí)驗(yàn)組RANKL表達(dá)水平接近于對照組的表達(dá)水平，無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＞0.05)。
　　 結(jié)論: