袖狀胃切除術(shù)附加改良空回腸旁路術(shù)安全性和療效的研究.pdf

1、第一部分Wistar大鼠袖狀胃切除術(shù)附加改良空回腸旁路術(shù)模型安全性的研究
　　目的:建立Wistar大鼠袖狀胃切除術(shù)附加改良空回腸旁路術(shù)模型并觀察其安全性。
　　方法:
　　(1)實驗動物分組
　　40只SPF級Wistar大鼠被隨機分成以下5組:袖狀胃切除術(shù)附加改良腸旁路組(SGMJIB)8只;SGMJIB術(shù)的假手術(shù)組(Sham-SGMJIB)8只,MJIB組8只,MJIB術(shù)的假手術(shù)組(Sham-MJIB)8只

2、,空白對照組(Control)8只。
　　(2)手術(shù)模型的建立
　　SGMJIB組的手術(shù)方法:游離胃底及胃大彎側(cè),距離幽門約5mm處起,用2把無損傷血管鉗沿胃大彎側(cè)相向鉗夾,確定切除線,沿大彎側(cè)切除包括大部分胃底在內(nèi)的約70~80％的胃組織,斷端消毒后連續(xù)全層內(nèi)翻縫合。在Treitz韌帶下25cm處的空腸近端選擇與距離回盲部25cm空腸行端側(cè)吻合。
　　MJIB組的手術(shù)方法:在Treitz韌帶下25cm處切開,近端選擇

3、與距離回盲部25cm空腸行端側(cè)吻合。
　　假手術(shù)組分別為:Sham-SGMJIB組、Sham-MJIB組,其手術(shù)方法為:于各手術(shù)組相應的解剖位點做原位胃腸切開縫合術(shù)。必要時,延長手術(shù)時間,以產(chǎn)生與手術(shù)組同等程度的麻醉及手術(shù)影響。
　　(3)一般情況的觀察
　　記錄手術(shù)成功率、術(shù)后成活率、每周的體質(zhì)量變化及大鼠術(shù)后的一般情況、并發(fā)癥。
　　(4)血液標本的檢測
　　術(shù)前及術(shù)后4周、12周采取血液標本用全自動生

4、化分析儀測定谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)、谷草轉(zhuǎn)氨酶(AST)、肌酐(Cr)、尿素(Urea)、白蛋白(Alb)、總蛋白(TP)等血生化指標。
　　(5)組織標本的采取和處理
　　術(shù)后12周采血后處死大鼠,取其肝臟、胃、手術(shù)后腸道進行大體的形態(tài)學觀察,肝臟濕重稱量(用于計算肝臟臟器系數(shù)),然后部分取材立即放入-80度冰箱凍存,另取部分肝臟標本浸入4%的多聚甲醛溶液中,分別采取皮胃、腺胃組織及腸道手術(shù)吻合口近端5cm(近段)、遠端5c

5、m(遠段)、曠置端5cm(曠置段)腸管各1cm浸入甲醛固定,對胃、腸、肝臟組織標本進行石蠟包埋后切片,常規(guī)HE染色。
　　(6)胃腸道的組織的鏡下觀察和顯微測量
　　在顯微鏡下對SGMJIB組、Sham-SGMJIB組與Control組皮胃、腺胃、近段、遠段、曠置段的腸管黏膜HE染色切片進行觀察,對皮胃的黏膜及黏膜下層厚度、腸道黏膜近段、遠段、曠置段的的絨毛高度、腺窩深度、黏膜厚度進行顯微測量,對測量數(shù)據(jù)分別進行統(tǒng)計學處理,

6、比較其形態(tài)的顯微計量學變化;
　　(7)肝臟組織的Masson染色及CYP2E1的表達情況
　　石蠟包埋后的肝臟組織切片行Masson染色,CYP2E1抗體免疫組化染色;凍存肝臟組織制作冰凍切片CYP2E1抗體免疫熒光染色;另取部分凍存肝臟組織行CYP2E1抗體的WesternBlot檢測。
　　結(jié)果:
　　(1)SGMJIB組和MJIB組的平均手術(shù)時間分別為72.2±9.64min、42.3±7.54min。S

7、GMJIB手術(shù)模型的成功率為100%,術(shù)后Sham-MJIB組因采血中麻醉意外死亡1只,至實驗結(jié)束大鼠存活率97.5%。SGMJIB組術(shù)后2只大鼠術(shù)后3天內(nèi)有腹瀉,自行恢復,各組大鼠除禁食、采血、手術(shù)干預時的時間外,其精神反應、行為活動、皮毛的色澤及糞便均未發(fā)現(xiàn)明確異常。SGMJIB組大鼠術(shù)后12周內(nèi)體質(zhì)量增長較慢,術(shù)后4周才恢復術(shù)前體質(zhì)量,在各術(shù)后時間點的體質(zhì)量均明顯低于Sham-SGMJIB組與Control組,差異具有顯著的統(tǒng)計學

8、意義(P<0.01);同時術(shù)后3周起以后的各時間點體質(zhì)量均低于MJIB組,差異具有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。
　　(2)各組大鼠手術(shù)前與術(shù)后4周、12周采集血標本檢測發(fā)現(xiàn),ALT、AST、Cr、Urea、TP、Alb在SGMJIB組和MJIB組與其對應的Sham組、Control組之間雖存在著不同程度的差異,但其差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05);
　　(3)術(shù)后肝臟大體形態(tài)學觀察,與其對應的Sham組和Control組比較

9、,SGMJIB組和MJIB組肝臟大體形態(tài)除顏色略深外無明顯差異,肝臟臟器系數(shù)與對應Sham組Control組差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05);胃組織大體觀察SGMJIB組大鼠大體顯示的殘留皮胃的彈性下降,皺襞變淺,鏡下形態(tài)皮胃黏膜、黏膜肌層較Sham-SGMJIB組與Control組變薄(P<0.05),黏膜肌層下組織較疏松。SGMJIB組和Sham-SGMJIB組腺胃的鏡下可見局部黏膜下有炎性細胞浸潤,SGMJIB組腺胃胃小凹的加深和

10、延長、固有層內(nèi)腺體擴張,部分可見胃內(nèi)黏膜下炎癥灶(淋巴細胞、漿細胞、嗜中性粒細胞),黏膜肌層厚度與正常組和假手術(shù)組接近,無腸道化生的改變。SGMJIB組的吻合口近段和遠段的腸絨毛高度、腺窩深度及黏膜厚度均較Sham組和Control組明顯增加(P<0.01),而曠置段的組織學改變則相反,呈萎縮性變化,與近段、遠段差異明顯(P<0.01)。SGMJIB組內(nèi)比較顯示:遠段和近段的腸絨毛高度、腺窩深度及黏膜厚度較曠置段明顯增加(P<0.01)

11、,且遠段的增加較近段更加明顯(P<0.01)。
　　(4)肝臟切片鏡下HE及Masson染色觀察,SGMJIB組和MJIB組除偶見點狀壞死灶,少量炎性細胞浸潤外,無明顯局灶性壞死,無肝細胞脂肪變性,膠原纖維顯色無明顯增加,無明顯的纖維化改變,而在Sham-SGMJIB組、Sham-MJIB組和Control組未發(fā)現(xiàn)明顯的病理形態(tài)學變化。肝臟組織切片CYP2E1抗體免疫組化結(jié)果顯示:SGMJIB組和MJIB組與其對應Sham組、Co

12、ntrol組比較,均可見中央靜脈(腺泡III區(qū))周圍2~3層細胞少量表達,腺泡Ⅱ區(qū)及Ⅰ區(qū)無明顯表達;在不同的肝組織內(nèi),CYP2E1表達強度及分布略有差異,各組之間CYP2E1抗體的組化表達按照Tsutsumi方法和常用的評分標準進行計分后比較,組間差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05);CYP2E1抗體在冰凍肝臟組織切片中的免疫熒光染色結(jié)果提示:肝臟細胞的CYP2E1抗體主要表達于肝細胞胞漿中,胞核內(nèi)未見其表達,表達主要集中在腺泡III區(qū),各

13、組之間熒光強度灰度值之間比較差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。CYP2E1抗體肝臟WesternBlot檢測發(fā)現(xiàn),SGMJIB組較Control組表達量增多,但其表達量與Sham組、Control組差異均無統(tǒng)計學意義(P>0.05),各組CYP2E1的相對表達量之間亦無顯著性差異(P>0.05)。
　　結(jié)論:Wistar大鼠SGMJIB模型簡單經(jīng)濟,相對穩(wěn)定安全;對大鼠模型的觀察和檢測發(fā)現(xiàn),術(shù)后大鼠雖然體重降低,但能通過胃腸道的代

14、償性調(diào)節(jié)保證其營養(yǎng)和電解質(zhì)的穩(wěn)定,術(shù)后肝臟無明顯的功能及組織學損害的表現(xiàn),SGMJIB大鼠模型在術(shù)后12周的觀察期內(nèi)安全性較好。
　　第二部分袖狀胃切除術(shù)附加改良腸旁路術(shù)治療病態(tài)性肥胖癥的療效和安全性研究
　　目的:探討袖狀切除附加改良空回腸旁路術(shù)(SleeveGastrectomyandModifiedJejunoilealBypass,SGMJIB)對病態(tài)性肥胖癥患者術(shù)后的減重和對其伴發(fā)病的療效,并了解手術(shù)的安全性。

15、r>　　方法:對2009年3月至2011年7月對華中科技大學同濟醫(yī)學院附屬同濟醫(yī)院整形美容外科行SGMJIB治療的7例病態(tài)性肥胖癥伴有多種合并癥的患者進行隨訪評估。收集所有病例的一般資料、手術(shù)時間、住院時間、體重評估相關(guān)指標(體重、身高、BMI、EWL%)、空腹血糖、血清甘油三脂、總膽固醇、尿酸值、伴發(fā)病的手術(shù)前后檢查結(jié)果、術(shù)后并發(fā)癥等相關(guān)資料和數(shù)據(jù)。計數(shù)資料以百分率表示。計量資料以x±s表示,組間比較采用SPSS20.0統(tǒng)計軟件進行配

16、對t檢驗。
　　結(jié)果:7例患者常規(guī)開腹行SGMJIB手術(shù),手術(shù)時間為280.29±80.59min,術(shù)后住院時間18.57±4.69d。術(shù)后隨訪10~39(27.13±11.33)個月,多余體重減少百分比(PercentExcessWeightLoss,%EWL)為53.15±19.18%;術(shù)后4例患者的血壓或血糖異?；謴土苏?緩解率100%;7例患者中高脂血癥2例恢復正常,4例有改善,1例變化不明顯,總有效率85.7%;脂肪肝

17、4例好轉(zhuǎn),3例術(shù)后變化不明顯,有效率57.1%;高尿酸血癥術(shù)后2例恢復正常,1例明顯好轉(zhuǎn),總有效率100%;術(shù)后4例睡眠呼吸綜合癥患者中3例癥狀消失,1例明顯減輕,睡眠質(zhì)量明顯改善;1例女性患者術(shù)后月經(jīng)趨于正常,順利懷孕產(chǎn)子;1例男性患者術(shù)后性生活質(zhì)量得到明顯改善。本組病例未發(fā)生出血、吻合口瘺、吻合口狹窄等手術(shù)相關(guān)并發(fā)癥。其中1例患者切口局部脂肪液化、切口局部裂開,經(jīng)換藥后縫合。3例患者手術(shù)1年后體重輕微反彈,部分患者自訴術(shù)后排氣增加,