紅霉素對博來霉素誘導(dǎo)的肺纖維大鼠肺組織TGF-β-Smad信號通路的影響.pdf

1、目的：本研究旨在通過紅霉素對TGF-β/Smad信號通路的調(diào)控，探討紅霉素是否對成纖維細(xì)胞的增殖轉(zhuǎn)型有直接的抑制作用及其可能的機(jī)制。
　　方法：健康雄性SD大鼠（清潔級）60只，隨機(jī)分為5組。分別為鹽水對照組(A組)、博來霉素組(B組)、博來霉素+紅霉素預(yù)處理組(C組)、博來霉素十紅霉素同時處理組(D組)、博來霉素+紅霉素后處理組(E組)。B組、C組、D組、E組均以博來霉5mg/kg一次性氣管內(nèi)給藥建立肺纖維動物模型；A組以同樣的

2、方法一次性氣管內(nèi)注入等體積的生理鹽水；C組、D組、E組分別在博來霉素給藥的前三天、當(dāng)天、后七天開始以紅霉素100mg/kg每日灌胃，而A組和B組分別每日灌胃等體積的生理鹽水。各組動物大鼠在造模14d、28d分兩次取材，每次各組隨機(jī)處死6只，共30只。肺組織HE染色和Masson染色電鏡觀察肺泡炎和肺纖維化改變；堿性水解法測定肺組織羥脯氨酸(Hyp)的含量；應(yīng)用免疫組織化學(xué)技術(shù)(SP法)和 RT-PCR法分別檢測各組大鼠肺組織中轉(zhuǎn)化生長因

3、子-β1(TGF-β1)、Smad3、Smad7、α-平滑肌肌動蛋白(α-SMA)蛋白及mRNA的表達(dá)。
　　結(jié)果：①肺組織病理學(xué)結(jié)果顯示A組大鼠肺組織未見肺泡間隔增寬和間質(zhì)炎癥，也無纖維化區(qū)和蜂窩狀改變；B組第14d肺泡腔內(nèi)能看到較多炎性細(xì)胞浸潤，纖維化區(qū)出現(xiàn)，有膠原沉積，肺組織結(jié)構(gòu)破壞；第28d時肺泡炎癥明顯減輕，嚴(yán)重纖維化形成，大量膠原沉積，肺組織結(jié)構(gòu)嚴(yán)重破壞。紅霉素各治療組肺泡炎和纖維化程度較模型組各相應(yīng)時間點均有不同程度

4、的減輕。②與A組比較，14d、28d時B組大鼠肺組織Hyp含量明顯增加，以28d時含量最高。C、D、E各組與A組比較羥脯氨酸含量有不同程度的增加，但是不及B組；與B組比較，C、D、E各組羥脯氨酸含量均有降低，差異有統(tǒng)計學(xué)意義，以C組降低明顯，其次為D組和E組，兩者比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義。③免疫組化和RT-PCR結(jié)果：A組TGF-β1、smad3和α-SMA都有少量表達(dá)，而 B組顯著增加，紅霉素各治療組三者均較模型組有不同程度減低，且差異有