Smad3、Smad7在百草枯中毒大鼠肺成纖維細胞中的表達及紅霉素對其影響.pdf

1、背景和目的：百草枯中毒是重要的中毒死亡原因之一。目前百草枯中毒尚無特效治療措施，死亡率極高。嚴重的百草枯中毒的特點是多器官功能衰竭，肺是主要的靶器官。肺部病變的特點是早期持續(xù)的肺泡炎和后期的肺纖維化。TGF-β/Smad信號通路的激活在肺纖維化的進程中發(fā)揮了重要作用。以紅霉素為代表的大環(huán)內(nèi)酯類抗生素中部分抗生素除了具有抗菌活性外，還具有非抗菌活性。本研究目的在于探討紅霉素除了通過調(diào)節(jié)炎癥反應對百草枯中毒所致肺纖維化具有干預作用外，是否具

2、有直接抗纖維化作用，是否對肺成纖維細胞的增殖和膠原的產(chǎn)生有直接的作用及其可能的機制。 方法：30只SD大鼠隨機分為6組：對照組(NS組)、紅霉素組(EM組)、百草枯中毒組(PQ組)、百草枯+紅霉素預處理組(PQ+EMpre組)、百草枯+紅霉素同時處理組(PQ+EMsyn組)、百草枯+紅霉素后處理組(PQ+EMpost組)。PQ組以百草枯80mg/kg一次性灌胃建立中毒模型；PQ+EMpre組、PQ+EMsyn組、PQ+EMpos

3、t組分別在中毒前3天、當天、中毒后1周開始以紅霉素50rag/kg每日灌胃；EM組和NS組分別每日灌胃50mg/kg的紅霉素和等體積的生理鹽水。所有動物在21天時處死(PQ+EMpre組在PQ中毒后21天處死)。取右上肺測量肺組織膠原含量，右下肺固定后行HE染色測量肺泡間隔面積。原代培養(yǎng)各組肺成纖維細胞，分別測量培養(yǎng)液中的膠原含量，MTT法測量成纖維細胞的增殖能力。采用免疫組化和原位雜交測定細胞Smad3、Smad7及其mRNA的表達情

4、況。 結(jié)果：PQ組大鼠肺組織肺泡間隔增寬，膠原含量增加，原代培養(yǎng)的成纖維細胞增殖能力和產(chǎn)生膠原的能力增強，合并使用紅霉素處理的各組大鼠上述改變減輕；中毒同時和中毒后1周使用無顯著差異，但均不及中毒前使用。PQ中毒的大鼠肺成纖維細胞Smad7 mRNA及Smad7的表達降低，使用EM對其表達無影響；PQ組Smad3 mRNA的表達減少，合并使用EM可以使Smad3 mRNA的表達增加，中毒同時和中毒后1周使用無顯著差異，但均不及中

5、毒前使用。PQ組Smad3在細胞漿的表達顯著減少，細胞核的表達增加，合并使用紅霉素處理的各組大鼠上述改變減輕；中毒同時和中毒后1周使用無顯著差異，但均不及中毒前使用。 結(jié)論：百草枯中毒大鼠成纖維細胞增殖和產(chǎn)生膠原的能力增強，Smad3 mRNA、Smad7 mRNA及Smad7的表達降低；Smad3在細胞漿的表達顯著減少而細胞核的表達增加。推測紅霉素對百草枯中毒導致的肺纖維化有干預作用，其機制可能與調(diào)節(jié)肺成纖維細胞Smad信號通