組織腎素-血管緊張素系統(tǒng)在急性胰腺炎發(fā)病機(jī)制中的作用及絡(luò)沙坦防治作用的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、第一部分:急性水腫型及急性壞死型胰腺炎大鼠模型的制作 目的:建立簡便、易復(fù)制、重復(fù)性好的急性水腫型胰腺炎（AEP）和急性壞死型胰腺炎（ANP）模型，為實(shí)驗(yàn)的第二部分和第三部分提供實(shí)驗(yàn)動物。方法:30只健康雄性SD大鼠，隨機(jī)分為正常對照組、AEP組、ANP組，每組10只。AEP組腹腔注射雨蛙素，40ug/kg，共2次，第一次注射后12小時造模成功。ANP組腹腔注射精氨酸，2g/kg，共2次，第一次注射后24小時造模成功。正常對照組

2、，給予同等劑量的生理鹽水腹腔注射。各組大鼠于實(shí)驗(yàn)結(jié)束時檢測血漿淀粉酶（AMY）、胰腺／體重比值以及胰腺組織病理學(xué)變化。結(jié)果: AEP組和ANP組大鼠AMY均較對照組明顯升高，ANP組升高更明顯；胰腺/體重比值也顯著升高，ANP組胰腺重量增加更明顯，與AEP組比較也有顯著增加；兩組的胰腺組織病理檢查顯示，AEP組大鼠胰腺組織表現(xiàn)為明顯水腫，胰腺葉間隔、小葉間隔間隙增大，炎性細(xì)胞浸潤，腺泡水腫明顯；ANP組大鼠胰腺葉間隔、小葉間隔間隙增大，

3、炎性細(xì)胞浸潤，腺泡水腫，部分壞死，小葉結(jié)構(gòu)破壞，可見實(shí)質(zhì)內(nèi)出血。結(jié)論:雨蛙素40ug/kg兩次和精氨酸2g/kg兩次腹腔注射，可以誘發(fā)大鼠AEP和ANP，此兩種動物模型操作簡便，容易復(fù)制，重復(fù)性好，模型形成迅速。 第二部分:組織腎素—血管緊張素系統(tǒng)在不同類型急性胰腺炎發(fā)病機(jī)制中的作用 目的:觀察組織腎素—血管緊張素系統(tǒng)（RAS）在AEP和ANP中的變化，組織RAS與細(xì)胞因子TNF—α、IL—1β以及RAS與急性胰腺炎（A

4、P）嚴(yán)重程度的關(guān)系，進(jìn)一步闡明組織RAS在AP發(fā)病機(jī)制中的作用。方法:30只健康雄性SD大鼠，隨機(jī)分為正常對照組、AEP組、ANP組，每組10只。采用雨蛙素腹腔注射誘導(dǎo)AEP模型，精氨酸腹腔注射誘導(dǎo)ANP模型，各組于造模成功后處死大鼠，觀察大鼠血漿血管緊張素Ⅱ（AngⅡ）、腎素、AMY、TNF—α、IL—1β水平變化，檢測胰腺/體重比值、胰腺組織病理變化，血管緊張素原和AngⅡ受體AT1在胰腺組織內(nèi)的免疫組化定位，RT—PCR法檢測胰腺

5、組織局部血管緊張素原、腎素及AngⅡ受體AT1mRNA水平。結(jié)果;AEP組和ANP組大鼠血漿AMY、TNF—α、IL—1β、AngⅡ、腎素水平均明顯升高，在ANP組中升高更明顯，統(tǒng)計(jì)學(xué)上差異顯著（p<0．05）。AEP組和ANP組大鼠血管緊張素原、腎素、AT1 mRNA水平較對照組明顯升高，ANP組較AEP組也略有升高。血漿AngⅡ水平與血漿TNF—α、IL—1β水平和胰腺組織病理評分有一定的相關(guān)性，血漿TNF—α、IL—1β水平和胰腺

6、組織病理評分也有一定的相關(guān)性。血管緊張素原和AngⅡ受體AT1在胰腺組織內(nèi)主要定位于胰腺血管壁和導(dǎo)管壁。結(jié)論:在胰腺組織中存在自己獨(dú)立的RAS系統(tǒng)，在AP發(fā)病時被激活，并進(jìn)一步激活TNF—α、IL—1β，共同參與了AP的發(fā)病機(jī)制。 第三部分:絡(luò)沙坦對急性壞死性胰腺炎及合并肺損傷的防治作用 目的:研究AngⅡ受體AT1拮抗劑絡(luò)沙坦（Losartan）對ANP大鼠是否有保護(hù)作用。方法:40只健康雄性SD大鼠隨機(jī)分為4組，正常

7、對照組、ANP組、Losartan預(yù)防組，Losartan治療組。采用大劑量精氨酸腹腔注射誘導(dǎo)ANP模型，預(yù)防組于造模前90分鐘給予Losartan200ug/kg，兩次，每次間隔1小時，治療組于造模后30分鐘給予Losartan200ug/kg，兩次，每次間隔1小時。各組于造模后24小時處死大鼠，觀察大鼠血漿AngⅡ、腎素、AMY、TNF—α、IL—1β水平變化，檢測肺組織髓過氧化物酶（MPO）、肺濕/干重比值、胰腺／體重比值、胰腺和

8、肺組織病理變化，RT—PCR法檢測胰腺組織血管緊張素原、腎素及AngⅡ受體AT1 mRNA的水平。結(jié)果:ANP組AngⅡ、腎素、AMY、TNF—α、IL—1β、胰腺/體重比值、肺組織MPO、肺濕/干重比值均較對照組明顯升高；胰腺組織血管緊張素原、腎素及受體AT1 mRNA的水平也較對照組升高，Losartan預(yù)防和治療組血漿AMY、TNF—α、IL—1β、肺組織MPO、肺濕／干重比值、胰腺／體重比值較ANP組明顯下降，胰腺和肺組織病理損