血管生成素-1對小鼠急性水腫型胰腺炎治療作用的實驗研究.pdf

1、目的:本實驗研究通過檢測急性水腫型胰腺炎(acute edematouspancreatitis,AEP)小鼠血清中氧自由基、淀粉酶(AMS)、白介素-6(IL-6)、腫瘤壞死因子(TNF-α)的含量及其胰腺組織病理學(xué)觀察,研究血管生成素-1(Angiopoietin-1,Ang-1)對小鼠AEP模型的療效及其作用機制,為臨床治療提供理論依據(jù)。
　　 方法:balb/c小鼠54只,雌雄各半,體重25～30g(河北醫(yī)科大學(xué)實驗動物

2、中心提供),編號1006039,隨機分為3組,其中A組為空白對照組(n=18),B組為模型組(n=18),C組為藥物治療組(n=18),各實驗組又分3個亞組,即9h、18h、24h亞組,各6只。本實驗?zāi)Ｐ徒M采用經(jīng)腹腔注射雨蛙素(Cn5mg/l,10ml/kg)方法制備小鼠.AEP模型,清潔級小鼠予以腹腔注射雨蛙素(50μg/kg),每小時注射1次,共7次;藥物治療組在制備AEP小鼠模型后腹腔給予Ang-1(100ug/kg);空白對照組

3、腹腔注射生理鹽水(10ml/kg)7次,每次間隔1h。按預(yù)定時間點處理小鼠切取胰腺,觀察胰腺大體標本,留取部分胰腺組織制備組織切片行HE染色,進行組織學(xué)觀察及組織病理學(xué)評分及測定丙二醛(MDA)、髓過氧化物酶(MPO)的含量;計算胰腺的濕/干重比;留取血清測定血清中淀粉酶、IL-6、TNF-α的含量。并利用spss13.0對數(shù)據(jù)進行分析。
　　 結(jié)果:
　　 1 胰腺組織觀察:①大體標本:A組為正常胰腺組織,無充血及水腫

4、;B組胰腺充血、水腫,可見少量皂化斑,腹腔內(nèi)少量腹水;C組見胰腺輕度腫脹,未見腹水。②光鏡下見:A組胰腺小葉形態(tài)正常,間質(zhì)內(nèi)無炎癥細胞及紅細胞;B組胰腺小葉排列紊亂,局限性小葉間距離增寬,小葉間可見少量炎癥細胞及紅細胞;C組胰腺小葉間隔增寬,導(dǎo)管周圍炎性浸潤,間質(zhì)內(nèi)少量炎癥細胞及紅細胞散在分布。⑨胰腺濕/干重比的測定結(jié)果:B組各時間點較A組同時間點值升高,差異有顯著性(P＜0.05):C組各時間點較B組同時間點值降低,其差異有顯著性(P

5、＜0.05)。④胰腺組織病理學(xué)評分結(jié)果:B組與A組相比在各時間點損傷程度均加重,其差異有顯著性(P＜0.05);B組隨時間延長各亞組損傷程度加重,各亞組間差異具有顯著性(P＜0.05);C組與B組相比在各時間點損傷程度均降低,差異有顯著性(P＜0.05)。
　　 2 氧自由基的測定結(jié)果:①MDA含量:B組與A組相比各亞組血清中MDA含量有明顯升高,其差異具有顯著性(P＜0.05);C組與B組相比各亞組血清中MDA含量未見明顯降低

6、,其差異不具有顯著性(P＞0.05)。②MPO含量:B組與A組相比各亞組血清中MPO含量有明顯升高,其差異具有顯著性(P＜0.05);C組與B組相比各亞組血清中MPO含量未見明顯降低,其差異不具有顯著性(P＞0.05)。
　　 3 血清淀粉酶測定結(jié)果:B組與A組相比各亞組血清淀粉酶值有明顯升高,其差異具有顯著性(P＜0.05),C組與B組相比各亞組血清淀粉酶值明顯降低,差異具有顯著性(P＜0.05)。
　　 4 IL-6

7、的測定結(jié)果:B組與A組相比各亞組血清中IL-6含量有明顯升高,其差異具有顯著性(P＜0.05);C組與B組相比各亞組血清中IL-6含量明顯降低,差異具有顯著性(P＜0.05)。
　　 5 TNF-α的測定結(jié)果:B組與A組相比各亞組血清中TNF-α含量有明顯升高,其差異具有顯著性(P＜0.05);C組與B組相比各亞組血清中TNF-α含量明顯降低,差異具有顯著性(P＜0.05)。
　　 6 相關(guān)性分析:血清MDA含量與胰腺組

8、織病理學(xué)評分相關(guān)系數(shù)r=0.697,P＜0.05;血清MPO含量與胰腺組織病理學(xué)評分相關(guān)系數(shù)r=0.813,P＜0.05。此結(jié)果表明,隨著MDA、MPO含量的增加,胰腺組織損傷程度越嚴重。
　　 結(jié)論:通過對小鼠急性水腫型胰腺炎的實驗研究,證實了急性水腫型胰腺炎可引起細胞因子及氧自由基含量的升高,進一步加重胰腺組織損傷,機體免疫功能失調(diào)。本實驗結(jié)果表明,Ang-1可以降低急性水腫型胰腺炎小鼠血清淀粉酶水平,具有下調(diào)促炎因子,減輕