應(yīng)用自體脂肪干細(xì)胞與聚乳酸-聚羥基乙酸共聚物修復(fù)兔角膜基質(zhì)缺損的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、[目的]通過系統(tǒng)的體外實(shí)驗(yàn)評(píng)價(jià)兔脂肪干細(xì)胞(rADSC)與聚乳酸-聚羥基乙酸共聚物(PLGA)的相容性。通過體內(nèi)實(shí)驗(yàn)研究自體脂肪干細(xì)胞與PLGA復(fù)合物修復(fù)兔角膜基質(zhì)缺損的療效,為尋找組織工程角膜基質(zhì)新的種子細(xì)胞以及支架提供新的思路。
　　 [方法]常規(guī)方法獲得rADSC及PLGA材料。利用Dio活細(xì)胞染色定性、細(xì)胞黏附率檢測、掃描電鏡及雙光子掃描電鏡觀察細(xì)胞在材料的生長情況。在體內(nèi)實(shí)驗(yàn)中,首先以腺病毒為載體轉(zhuǎn)染綠色熒光蛋白(GF

2、P)基因至rADSC,而后將其接種于材料上進(jìn)行下一步實(shí)驗(yàn)。實(shí)驗(yàn)組分為單純材料移植組、單純角膜基質(zhì)切除組及自體角膜移植組,利用HE染色、活體共聚焦角膜顯微鏡、免疫組織化學(xué)染色檢查,激光掃描共聚焦顯微鏡及透射電鏡檢查評(píng)價(jià)細(xì)胞材料復(fù)合物植入兔角膜基質(zhì)缺損的修復(fù)情況。
　　 [結(jié)果]細(xì)胞與材料的黏附率最高可達(dá)99％。掃描電鏡、Dio活細(xì)胞染色及雙光子掃描電鏡檢查表明細(xì)胞在材料表面及內(nèi)部生長良好,分布均勻。移植細(xì)胞材料復(fù)合物9周后,角膜恢