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文檔簡介
1、野鳥尤其是以雁鴨類為主的水禽(鴨和鵝)是禽流感病毒(AIV)的天然宿主庫,幾乎所有亞型的AIV都已在世界范圍內的野鳥尤其是野生水禽體內分離出,而高致病性禽流感或低致病性禽流感的暴發(fā)一般也都來源于野鳥或水禽。H5N1亞型高致病性禽流感病毒(HPAIV)曾給世界養(yǎng)禽業(yè)帶來十分慘重的經濟損失,一直受到公共衛(wèi)生等領域的密切關注,雖然低致病性禽流感病毒(LPAIV)致病性較低,但存在異常廣泛,大部分LPAIV能夠在水禽體內長期適應卻不發(fā)病,在種群
2、內或種群間長期循環(huán)存在,易發(fā)生基因重組、變異、宿主易感性改變,甚至有轉變?yōu)镠PAIV的潛在危險,因此由其帶來的損失亦不容忽視。水禽包括鴨是攜帶和傳播AIV的一個特殊而重要的群體,可長時間的帶毒并向外界排毒,具有潛在感染其他宿主的危險,而AIV對水禽的致病力也已經發(fā)生明顯改變,因此研究AIV對水禽的致病性和病毒傳播方式以及水禽AIV傳播中的作用更加成為人們關注的熱點。
為確定家鴨及野鴨在HPAIV和LPAIV傳播中所起的作用,明
3、確LPAIV和HPAIV的傳播方式,驗證科學界對遷徙野鳥在H5N1AIV傳播機制探討中所作的“跳躍式和接力式”傳遞方式的假設,本研究選取兩株黑龍江省三江自然保護區(qū)野鳥源低致病性禽流感病毒,A/Garganey/SanJiang/160/2006(H5N2)(簡稱H5N2 SJ160)和A/Mallard/SanJiang/162/2006(H6N2)(簡稱H6N2 SJ162)分別以106EID50的劑量,通過自然孔(眼、咽、鼻、泄殖腔
4、)對幼齡(2周齡等)家鴨(SPF紹興麻鴨)及野鴨(綠頭鴨)進行感染,觀察感染鴨臨床癥狀、病毒排出和復制、組織器官損傷、血清抗體轉陽情況,判斷病毒對鴨的感染和致病力,確定LPAIV傳播方式及鴨在LPAIV傳播中的作用。本研究還構建了兩株LPAIV感染陽性狀態(tài)下(血清抗體陽性)的幼齡(5周齡)家鴨模型,進行一株野鳥源高致病性禽流感病毒A/Bar Headed Goose/Qinghai/3/05(H5N1)(簡稱H5N1BHG05)的感染試
5、驗研究,感染劑量為105EID50,通過自然孔(眼、咽、鼻、泄殖腔)接種,觀察感染鴨臨床癥狀、病毒排出和復制、組織器官損傷、血清抗體轉陽情況,以確定野鳥攜帶或感染的低致病力毒株是否可以抵抗HPAIV對家鴨進行感染,同時,分別以105EID50和106EID50進行HPAIV A/BarHeaded Goose/Qinghai/3/05(H5N1)對幼齡(3周齡等)及亞成體(13周齡)家鴨和野鴨的感染性試驗,觀察感染鴨臨床癥狀、病毒排出和
6、復制、組織器官損傷、血清抗體轉陽情況,判定病毒致病性,從而探討家鴨甚至野鴨在流感病毒傳播中的作用,正確定位家鴨及野鴨在AIV綜合防控中的角色。本研究可得出以下結論:
1.野鳥源LPAIV H5N2SJ160對1日齡、2周齡SPF幼齡家鴨(紹興麻鴨)和幼齡綠頭鴨均呈現(xiàn)低致病性,臨床癥狀輕微,無死亡。病毒易感性與幼齡鴨日齡和宿主的種類有關,2周齡的SPF家鴨和綠頭鴨比1日齡的鴨對病毒更敏感,SPF家鴨比綠頭鴨對病毒更敏感。
7、 2.野鳥源LPAIV H5N2SJ160和H6N2SJ162對2周齡SPF幼齡家鴨(紹興麻鴨)均呈低致病性,臨床癥狀輕微,無死亡。試驗鴨以泄殖腔排毒為主,排毒量較高,排毒時間較長(最長可達10dpi)。病毒僅能在盲腸扁桃體和法氏囊兩個器官組織中較高水平復制,僅對少數組織器官造成不同程度的病理組織損傷。
3.2周齡SPF幼齡家鴨對病毒H5N2SJ160和H6N2SJ162均敏感,染毒后既可排出病毒,又可進行病毒水平傳播,提示
8、自然狀態(tài)下,特別是在高度集群密切接觸時,易于發(fā)生個體間病毒的傳播,在兩個亞型LPAIV傳播中可起到一定作用。病毒在2周齡SPF鴨消化道內比呼吸道內更能優(yōu)先復制,推斷該兩株病毒的傳播更符合口泄口傳播的方式。
4.2周齡SPF幼齡家鴨同亞型(H5N2)組和異亞型(H6N2)組的LPAIV超前免疫均可改變H5N1亞型HPAIV對鴨的感染,臨床癥狀、病毒排出與復制、病理組織損傷、血清抗體檢測情況各有不同,其中,同亞型(H5N2)組超前
9、免疫要優(yōu)于異亞型(H6N2)組,可更有效地抵抗H5N1亞型HPAIV的感染。異亞型(H6N2) LPAIV組感染家鴨排毒率更高,排毒量更大,更適合完成HPAIV的長距離傳播,在HPAIV的傳播過程中具有更大的潛在危險,本研究為國內首次通過試驗在一定程度上支持野鳥感染H5N1后相對于家禽感染會有更長的潛伏期和病程的推測,也將進一步支持科學界對遷徙野鳥在H5N1傳播機制探討中所作的“跳躍式和接力式”傳遞方式的假設。
5.野鳥源HP
10、AIV H5N1BHG05對不同周齡(幼齡和亞成體)的SPF家鴨和綠頭鴨致病性不同,病毒雖可在不同周齡、不同種類鴨體內多個器官高水平復制,造成不同程度的病理損傷,但致病性與水禽年齡、宿主類型有關。相同日齡的SPF家鴨和野鴨(綠頭鴨)對HPAIVH5N1BHG05感染情況為SPF鴨比綠頭鴨更易感,幼齡家鴨比亞成體家鴨更易感,其中對3周齡SPF幼齡家鴨致病性最強,死亡率最高,可達100%;對13周齡亞成體綠頭鴨致病性相對最低。6周齡SPF幼
11、齡家鴨排毒最強(最高病毒滴定可達10203EID50/0.1mL),13周齡亞成體綠頭鴨排毒時間與13周齡亞成體SPF家鴨一致(最長可達7天以上),但HPAIV傳播與LPAIV有所不同,雖具有直接接觸感染的能力,但個體間病毒傳播能力稍差。
6.1周齡和2周齡SPF幼齡家鴨對病毒H5N1BHG05并不敏感,不排出病毒,也不具有病毒傳播作用。3-6周齡SPF幼齡家鴨病毒感染后具有明顯的排毒現(xiàn)象(最高病毒滴定可達10203EID50
12、/0.1mL),也可進行病毒水平傳播(同居感染對照組鴨可自然感染病毒),推測在AIV病毒傳播中可起到一定作用。而13周齡亞成體鴨感染病毒后不明顯發(fā)病,但可微量的排出病毒(13周齡亞成體SPF家鴨可達1015EID50/0.1mL),羽髓中亦有病毒存在(13周齡亞成體綠頭鴨可達10125EID50/0.1mL),所以在HPAIV傳播的過程中意義可能同樣重大。
7.野鳥源HPAIV H5N1BHG05試驗感染幼齡鴨及亞成體鴨后以呼
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