新生小鼠回輸CTLA4Ig基因修飾的樹突狀細(xì)胞誘導(dǎo)哮喘耐受長(zhǎng)期性的研究.pdf

1、本文從以下幾個(gè)部分展開論述：
　　第一部分 OVA誘導(dǎo)哮喘小鼠模型的建立
　　目的:建立卵清蛋白(OVA)誘導(dǎo)的BALB/c小鼠哮喘模型，通過小鼠的癥狀表現(xiàn)、病理學(xué)、炎性指標(biāo)等3方面來驗(yàn)證并確立動(dòng)物模型是否成功，為后續(xù)研究奠定實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)。
　　方法:SPF級(jí)6-8周BALB/c雌鼠20只，隨機(jī)分為正常對(duì)照組和哮喘陽性組。哮喘陽性組于第0和14天注射OVA致敏，第21～30天霧化吸入5％ OVA激發(fā);正常對(duì)照組用生理鹽水替

2、代。通過觀察兩組小鼠激發(fā)時(shí)的表現(xiàn)、肺部病理切片、支氣管肺泡灌洗液(BALF)中細(xì)胞總數(shù)、嗜酸細(xì)胞計(jì)數(shù)及血清和BALF中IgE、IL-4及IFN-γ水平改變了解小鼠氣道炎癥情況。
　　結(jié)果:哮喘陽性組小鼠在霧化過程中均出現(xiàn)不同程度的呼吸加快，弓背直立、前肢縮抬等哮喘速發(fā)相反應(yīng)表現(xiàn)。肺組織病理切片顯示小支氣管及伴行血管周圍有較多炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)，見大量嗜酸性粒細(xì)胞，血管壁明顯水腫，平滑肌增厚等。哮喘陽性組較正常對(duì)照組小鼠BALF中細(xì)胞總數(shù)

3、和嗜酸細(xì)胞計(jì)數(shù)顯著升高;血清和BALF中IgE、IL-4顯著升高，IFN-γ顯著降低。
　　結(jié)論:成功建立了OVA致敏/激發(fā)的BALB/c小鼠哮喘模型。
　　第二部分 新生小鼠回輸CTLA4Ig修飾的樹突狀細(xì)胞誘導(dǎo)哮喘耐受長(zhǎng)期性的研究
　　目的:研究將CTLA4Ig基因修飾的樹突狀細(xì)胞回輸給新生小鼠，觀察其對(duì)青年期和老年期OVA致敏/激發(fā)的哮喘小鼠氣道炎癥的影響，驗(yàn)證其誘導(dǎo)哮喘耐受長(zhǎng)期性的效果。
　　方法:將前期

4、已制備的CTLA4Ig基因修飾的樹突狀細(xì)胞通過尾靜脈回輸給新生期BALB/c小鼠，分別在小鼠青年期（6-8周）和老年期(22-24周)以O(shè)VA致敏/激發(fā)，并設(shè)立正常對(duì)照組、哮喘陽性組和AdGFP-DC干預(yù)組，通過檢測(cè)各組小鼠肺功能、BALF中嗜酸粒細(xì)胞比例、肺部病理切片及血清和BALF中IgE、IL-4、IL-10及IFN-γ水平了解小鼠氣道炎癥情況。
　　結(jié)果:
　　1、新生期給予CTLA4Ig基因修飾的樹突狀細(xì)胞可明顯延

5、緩在青年組和老年組中增強(qiáng)的呼吸間歇Penh值上升趨勢(shì)。
　　2、新生期給予CTLA4Ig基因修飾的樹突狀細(xì)胞可明顯減少青年組和老年組哮喘小鼠BALF中嗜酸性細(xì)胞的生成和肺組織病理中氣道炎癥反應(yīng)。
　　3、新生期給予CTLA4Ig基因修飾的樹突狀細(xì)胞可以降低青年組和老年組哮喘小鼠血清和BALF中IgE、IL-4水平以及IL-4/IFN-γ比值;可以提高青年組和老年組哮喘小鼠血清中IL-10水平;對(duì)青年組和老年組哮喘小鼠血清和B