殼聚糖膜緩釋給藥系統(tǒng)植入脈絡(luò)膜上腔治療兔眼金黃色葡萄球菌性眼內(nèi)炎.pdf

1、目的： 比較玻璃體腔注射萬(wàn)古霉素聯(lián)合脈絡(luò)膜上腔植入載有曲安奈德的殼聚糖藥膜、玻璃體腔注射萬(wàn)古霉素聯(lián)合曲安奈德混懸液和玻璃體腔單獨(dú)注射萬(wàn)古霉素對(duì)兔金黃色葡萄球菌性眼內(nèi)炎的治療作用，評(píng)價(jià)殼聚糖緩釋藥膜植入脈絡(luò)膜上腔的安全性及有效性。 方法： 選取健康青紫藍(lán)兔30只(廣州軍區(qū)武漢總醫(yī)院實(shí)驗(yàn)中心提供)，體重2.5～3.0kg，雌雄不限，術(shù)前裂隙燈、間接眼底鏡排除眼部疾患。實(shí)驗(yàn)兔均于右眼玻璃體腔注射ATCC25923標(biāo)準(zhǔn)金

2、黃色葡萄菌104CFU/0.1mL混懸液0.1mL，建立眼內(nèi)炎模型24h后，確認(rèn)模型建立成功，將實(shí)驗(yàn)動(dòng)物隨機(jī)分為3組，每組10只眼，A(玻璃體腔注射萬(wàn)古霉素)組、B(玻璃體腔注射萬(wàn)古霉素+曲安奈德混懸劑)組、C(玻璃體腔注射萬(wàn)古霉素+脈絡(luò)膜上腔植入殼聚糖緩釋藥膜(載曲安奈德))組。載有曲安奈德的殼聚糖膜緩釋給藥系統(tǒng)由武漢理工大學(xué)生物中心提供。干預(yù)后每日裂隙燈及間接眼底鏡觀察，于干預(yù)后第3、7、14天進(jìn)行臨床炎癥評(píng)分，干預(yù)后第7、14天進(jìn)

3、行眼前節(jié)照相；干預(yù)5d抽取少許玻璃體進(jìn)行細(xì)菌培養(yǎng)；注射細(xì)菌24小時(shí)后及干預(yù)后14d進(jìn)行B超檢查，觀察玻璃體腔積膿及視網(wǎng)膜脫離情況；干預(yù)后14d摘除所有術(shù)眼行光鏡檢查了解視網(wǎng)膜各層結(jié)構(gòu)的完整性、電鏡觀察視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)的改變。采用SPSS11.0統(tǒng)計(jì)軟件包進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。不同時(shí)間點(diǎn)各組間臨床炎癥評(píng)分采用多個(gè)相關(guān)樣本的非參數(shù)檢驗(yàn)的Friedman檢驗(yàn)法、各組間細(xì)菌培養(yǎng)陽(yáng)性率采用R×C資料的x2檢驗(yàn)、視網(wǎng)膜脫離發(fā)生率的比較采用R×C

4、資料的x2檢驗(yàn)，各組間率的比較采用Bonfferoni檢驗(yàn)，P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。 結(jié)果： 注入細(xì)菌后24h，所有實(shí)驗(yàn)動(dòng)物眼瞼水腫，結(jié)膜明顯充血、水腫，角膜水腫明顯，前房閃輝(+)，前房滲出(+)。干預(yù)后3d、7d、14d進(jìn)行臨床炎癥分級(jí)，可見(jiàn)所有實(shí)驗(yàn)動(dòng)物角膜逐漸透明，前房閃輝逐漸減輕，滲出趨于吸收，玻璃體混濁不同程度減輕，C組炎癥減輕明顯。不同觀察點(diǎn)3d、7d、14d，3組間比較統(tǒng)計(jì)結(jié)果：1)結(jié)膜量分別為x2

5、=8.720，14.788，13.034；P=0.013，0.001，0.001；2)角膜統(tǒng)計(jì)量分別為x2=11.793，7.063，11.308；p=0.003，0.000，0.004；3)虹膜統(tǒng)計(jì)量分別為x2=8.897，13.786，9.923；P=0.012，0.001，0.007；4)玻璃體統(tǒng)計(jì)量分別為x2=8.000，7.760，9.923；P=0.018，0.021，0.007。不同時(shí)間點(diǎn)兩兩組間結(jié)膜、角膜、虹膜和玻璃體評(píng)

6、分均有顯著性差異P<0.05。干預(yù)后5d玻璃體細(xì)菌學(xué)培養(yǎng)檢出情況：A組3/10，B組3/10，C組2/10；A、B、C3組間細(xì)菌培養(yǎng)陽(yáng)性檢出率無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義P=0.830。注入細(xì)菌后24h，B超檢查顯示全部實(shí)驗(yàn)動(dòng)物玻璃體腔均有積膿形成，脈絡(luò)膜增厚；干預(yù)后14d再次行B超檢查，不同治療方法利用R×C資料的z2檢驗(yàn)：3組間視網(wǎng)膜脫離有顯著性差異x2=8.416，P=0.015。各組間率的比較采用Bontferoni檢驗(yàn)：A、B組間視網(wǎng)膜脫離率

7、無(wú)顯著性差異(P=0.322)說(shuō)明B法并不優(yōu)于A法；B、C組間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.002)，A、C組間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.000)，C法優(yōu)于A、B法。干預(yù)后14d，大體標(biāo)本可見(jiàn)A、B組角膜均呈中度或輕度水腫，C組角膜透明；A、B2組玻璃體腔幾乎均有積膿，C組藥膜植入處微隆起，縫線可見(jiàn)。玻璃體腔均未見(jiàn)積膿形成。光鏡下，A、B2組角膜鱗狀上皮增生，炎性細(xì)胞浸潤(rùn)，角膜層間可見(jiàn)血管長(zhǎng)入，C組角膜各層完整，無(wú)水腫，接近正常角膜；A、B

8、2組虹膜水腫、增生明顯，部分血管擴(kuò)張，急、慢性炎細(xì)胞浸潤(rùn)；C組虹膜無(wú)充血。A組玻璃體腔大量滲出、炎性細(xì)胞浸潤(rùn)、壞死物及變性的玻璃體均質(zhì)紅染，視網(wǎng)膜結(jié)構(gòu)紊亂，視網(wǎng)膜各層細(xì)胞廣泛壞死；B組玻璃體腔局部紅染，散在的炎細(xì)胞浸潤(rùn)，視網(wǎng)膜結(jié)構(gòu)基本正常，內(nèi)、外顆粒層分布紊亂，神經(jīng)上皮層脫失；C組玻璃體腔玻璃體腔少許炎細(xì)胞浸潤(rùn)，未見(jiàn)明顯變性的玻璃體，視網(wǎng)膜各層次分明，結(jié)構(gòu)清晰，脈絡(luò)膜血管增粗，間隙放置藥膜處見(jiàn)殘余的藥膜均質(zhì)紅染，周圍未見(jiàn)炎細(xì)胞浸潤(rùn)。干預(yù)

9、14d透射電鏡下可見(jiàn)，A組視網(wǎng)膜色素上皮層正常細(xì)胞形態(tài)幾乎消失，大量空泡樣改變，細(xì)胞器不能辨認(rèn)，C組視網(wǎng)膜色素上皮層細(xì)胞形態(tài)規(guī)則，細(xì)胞器顯示清晰，B組介于兩者之間。 結(jié)論： 殼聚糖藥膜有良好的組織相容性，植入實(shí)驗(yàn)兔脈絡(luò)膜上腔無(wú)眼刺激性，殼聚糖藥膜初期的藥物暴釋現(xiàn)象控制了炎癥的進(jìn)一步發(fā)展，而將藥膜植入脈絡(luò)膜上腔更是讓抗菌素充分的發(fā)揮了其強(qiáng)大的抗菌作用。玻璃體腔注射萬(wàn)古霉素聯(lián)合殼聚糖藥膜植入脈絡(luò)膜上腔使得萬(wàn)古霉素和曲安奈德在