SERCA2a基因轉(zhuǎn)導過表達對心衰犬離體心肌細胞收縮功能的影響.pdf

1、目的：研究重組腺病毒(AV)為載體的心肌漿網(wǎng)肌漿網(wǎng)Ca2+-ATP酶(SERCA2a)基因轉(zhuǎn)導對慢性心力衰竭犬離體心肌細胞收縮功能的影響。
　　 方法：分對照組和實驗組,對照組犬即假手術(shù)組,實驗組犬通過快速起搏建立犬的慢性心衰模型。通過膠原酶消化法分離犬心肌細胞,將分離的心肌細胞分為未轉(zhuǎn)染組、轉(zhuǎn)染EGFP組、染轉(zhuǎn)EGFP+SERCA2a三組培養(yǎng)48小時,通過免疫印跡法檢測各組心肌細胞SERCA2a蛋白表達水平,利用單細胞收縮動態(tài)

2、邊緣檢測系統(tǒng)(IonOptix)測定即刻分離和48小時各組心肌細胞收縮功能的改變。
　　 結(jié)果： Western blotting檢測SERCA2a表達水平,與對照組心肌細胞組相比,心衰組SERCA2a蛋白表達明顯降低(P<0.01),心衰組轉(zhuǎn)染SERCA2a基因48小時后蛋白表達基本恢復對照組水平(P>0.05)。與對照組相比,即刻分離的心衰組的心肌細胞基礎(chǔ)收縮(1mM)收縮幅度百分比明顯降低(3.241±1.260％vs1.

3、479±0.606％,P<0.01)；與心衰心肌細胞未轉(zhuǎn)染組相比,過表達SERCA2a后心衰心肌細胞基礎(chǔ)收縮(1mMCa2+濃度)和最大收縮(激動劑刺激)均明顯改善[(1.000±0.366％vs3.339±0.907％。P<0.01)和(5.535±2.7707％vs11.233±2.574％P<0.01)]:與對照組未轉(zhuǎn)染組相比,轉(zhuǎn)染SERCA2a心衰心肌細胞基礎(chǔ)收縮收縮幅度百分比恢復至對照組水平[(2.053±1.567)％vs(