β2AR基因表達對衰犬心肌細胞收縮功能影響及其機制的探究.pdf

1、目的：研究轉(zhuǎn)β2腎上腺素受體(β2-adrenergic receptors，β2AR)基因?qū)π乃ト募〖毎湛s功能的影響及其內(nèi)在機制的探討。
　　 方法：通過快速起搏法制備犬心衰模型并采用膠原酶消化法分離出心衰犬心肌細胞，轉(zhuǎn)染攜帶β2AR基因的重組腺病毒，通過免疫印跡法檢測心肌細胞β2AR蛋白表達水平，采用單細胞收縮動態(tài)邊緣檢測系統(tǒng)測定心肌細胞收縮功能的改變，采用酶聯(lián)免疫吸附法(enzyme-linked immunosorb

2、nent assays，ELISA)法檢測心肌細胞的環(huán)磷酸腺苷(cyclic adenosine monophosphate，cAMP)水平。
　　 結(jié)果：與對照組(假手術(shù)組)相比，心衰時心肌細胞β2AR蛋白表達水平?jīng)]有明顯改變，即刻分離的心衰組心肌細胞基礎(chǔ)(即1mMCa2+濃度下)收縮幅度百分比[(1.809±0.922)％vs(1.120±0.432)％，P<0.05]、最大收縮幅度百分比[(14.855±2.377)％vs

3、(10.784±2.675)％，P<0.01]及基礎(chǔ)cAMP水平[(9.39±2.54)pmol/mL vs(5.26±0.95)pmol/mL，n=6，P<0.05]均明顯減低；心衰犬心肌細胞轉(zhuǎn)β2AR基因48h后，與未轉(zhuǎn)染組相比，轉(zhuǎn)染組心肌細胞基礎(chǔ)收縮幅度百分比[(0.851±0.324)％vs(1.629±0.522)％，P<0.05]、最大收縮幅度百分比[(9.260±2.208)％vs(12.205±1.437)％，P<0.0