人參皂苷Rg3聯(lián)合蘇拉明對(duì)小鼠肺癌TGF-β1和ERK信號(hào)通路的影響.pdf

1、目的：采用低毒副作用的中藥人參皂苷Rg3和西藥蘇拉明聯(lián)合應(yīng)用對(duì)小鼠Lewis肺癌生長(zhǎng)和轉(zhuǎn)移的抑制作用，并探討其抑瘤的相關(guān)作用機(jī)制。
　　方法：將40只C57BL6小鼠右大腿內(nèi)側(cè)接種Lewis肺癌細(xì)胞成瘤后隨機(jī)分為5組，分別為對(duì)照組、順鉑組、人參皂苷Rg3組、蘇拉明組、人參皂苷Rg3+蘇拉明聯(lián)合組，每組8只。于腫瘤接種第4天開始進(jìn)行干預(yù)，對(duì)照組予生理鹽水，順鉑組予3mg／（kg·5d），人參皂苷Rg3組予5 mg／（kg·d），蘇拉

2、明組予10 mg／（kg·d），人參皂苷Rg3+蘇拉明聯(lián)合組（聯(lián)合組）予人參皂苷Rg35 mg／（kg·d）和蘇拉明10 mg／（kg·d）。用藥期間觀察小鼠一般狀態(tài)、藥物不良反應(yīng)、測(cè)小鼠移植瘤生長(zhǎng)體積；藥物干預(yù)16天后取肺組織，計(jì)算肺表面轉(zhuǎn)移結(jié)節(jié)數(shù)，剝?nèi)∫浦擦霾⒎Q重，計(jì)算各給藥組的抑瘤率；采用HE染色觀察肺組織病理改變，免疫組化法測(cè)移植瘤CD34（即MVD）的表達(dá)，RT-PCR法測(cè)移植瘤TGF-β1、MEK1/2和ERK1/2的mRN

3、A表達(dá)，蛋白質(zhì)印跡法測(cè)TGF-β1、MEK1/2、ERK1/2、p-ERK1/2的蛋白表達(dá)。
　　結(jié)果:
　　1．小鼠移植瘤生長(zhǎng)及肺轉(zhuǎn)移情況第12-20天對(duì)照組小鼠腫瘤體積增長(zhǎng)速度明顯較其他給藥組快，聯(lián)合組增長(zhǎng)最慢（P<0.05）。各藥物干預(yù)組移植瘤質(zhì)量較對(duì)照組低，聯(lián)合組低于其他給藥組（P<0.05），對(duì)照組、順鉑組、人參皂苷Rg3組、蘇拉明組、聯(lián)合組腫瘤質(zhì)量分別為（5.60±0.34）g、（4.50±0.40）g、（3.6

4、0±0.31） g、（3.58±0.27）g、（2.82±0.26）g，肺轉(zhuǎn)移結(jié)節(jié)數(shù)分別為7.00±3.02、4.75±2.12、3.13±1.25、2.75±1.67、0.75±0.71，與移植瘤質(zhì)量具一致性（P<0.05），轉(zhuǎn)移率分別為（8/8、8/8、8/8、7/8、5/8）％，順鉑組、人參皂苷 Rg3組、蘇拉明組、聯(lián)合組抑瘤率分別為19.69%、35.37%、35.85%和49.39%，轉(zhuǎn)移抑制率分別為32.1%、55.3%、6

5、0.7%、89.3%。人參皂苷Rg3與蘇拉明兩因素兩水平的抑瘤率以及肺轉(zhuǎn)移抑制率的析因分析提示有交互作用，人參皂苷 Rg3與蘇拉明聯(lián)合應(yīng)用對(duì)抑制小鼠肺癌的生長(zhǎng)與轉(zhuǎn)移具有協(xié)同作用。
　　2．小鼠移植瘤 MVD的表達(dá)藥物干預(yù)后，各給藥組MVD表達(dá)較對(duì)照組低，且聯(lián)合組低于其他給藥組（P<0.05），人參皂苷Rg3+蘇拉明聯(lián)合組抑制微血管效果較其單獨(dú)應(yīng)用更明顯，各組 MVD表達(dá)分別為24.06±2.40、19.41±1.98、13.06±

6、1.92、12.09±1.49和6.16±1.17。
　　3．藥物干預(yù)后小鼠移植 TGF-β1的表達(dá)對(duì)照組未經(jīng)藥物干預(yù) TGF-β1表達(dá)均較其他藥物干預(yù)組高，處于高表達(dá)狀態(tài)，各藥物組被干預(yù)后 TGF-β1的表達(dá)下降，且人參皂苷 Rg3和蘇拉明聯(lián)合組下降較其單獨(dú)用藥組下降更明顯（P<0.05），各組TGF-β1 mRNA相對(duì)量分別為（86.17±8.28）%、（64.69±6.63）%、（49.37±4.24）%、（46.85±4.

7、56）%、（32.08±3.78）%，各組 TGF-β1蛋白的相對(duì)量分別為（114.68±17.06）%、（86.40±18.46）%、（65.54±20.02）%、（66.72±18.86）%、（45.79±16.06）%。
　　4．藥物干預(yù)對(duì)小鼠移植瘤ERK信號(hào)通路的影響人參皂苷Rg3和蘇拉明對(duì)MEK1/2表達(dá)影響小，而是抑制了ERK1/2的表達(dá)，且p-ERK1/2明顯被抑制， ERK1/2活化降低；各組MEK1/2 mRNA

8、和各組MEK1/2蛋白表達(dá)相對(duì)量無明顯差異（P>0.05）；各組 ERK1/2 mRNA相對(duì)量分別為（71.93±13.47）%、（56.43±11.01）%、（45.27±8.82）%、（43.29±7.48）%和（28.75±5.41）%；ERK1/2蛋白相對(duì)量分別為（104.18±9.78）%、（84.61±7.66）%、（76.71±7.25）%、（74.01±7.41）%和（51.69±5.29）%；p-ERK1/2蛋白相對(duì)量

9、分別為（112.96±9.49）%、（87.86±6.77）%、(61.26±8.48)%、（38.60±10.66）%和（9.57±3.42）%。
　　5．各項(xiàng)指標(biāo)的相關(guān)性 MVD、TGF-β1、ERK1/2表達(dá)的各項(xiàng)指標(biāo)與抑瘤率呈直線負(fù)相關(guān)，與肺轉(zhuǎn)移結(jié)節(jié)數(shù)呈直線正相關(guān)，MVD與TGF-β1、ERK1/2表達(dá)的各項(xiàng)指標(biāo)呈直線高度正相關(guān)（P<0.05）。
　　結(jié)論：
　　1.人參皂苷Rg3、蘇拉明具有抑制小鼠Lewis