三聚氰胺和生物信使分子硫化氫的熒光光譜檢測(cè)研究.pdf

1、硫化氫（hydrogen sulfide，H2S）是一種毒性很強(qiáng)的環(huán)境污染物，是重要的衛(wèi)生檢測(cè)項(xiàng)目。新近發(fā)現(xiàn)內(nèi)源性 H2S是第三種生物信使分子，有關(guān)H2S的內(nèi)源性生成、生物學(xué)效應(yīng)、H2S供體和病理生理學(xué)意義等多方面的研究工作，都需要準(zhǔn)確檢測(cè)生物信使分子H2S的含量，應(yīng)用現(xiàn)有檢測(cè)方法存在不少困難，開展生物信使分子H2S新的檢測(cè)方法研究具有重要意義。
　　三聚氰胺（Melamine；MM）是一種化工原料，在人體內(nèi)可形成難溶性鹽而導(dǎo)致尿

2、路系統(tǒng)結(jié)石，嚴(yán)重危害人體健康。由于加入 MM可虛假提高乳制品的蛋白質(zhì)含量，近年來，MM被非法用作食品添加物，引發(fā)了嚴(yán)重的乳制品污染突發(fā)事件。檢測(cè)食品中的MM已經(jīng)成為人們高度關(guān)注的食品安全工作。
　　本文第二章，基于內(nèi)源性H2S對(duì)熒光素汞熒光強(qiáng)度的抑制作用，建立了生物信使分子硫化氫的高靈敏熒光猝滅光譜檢測(cè)新方法。在KH2PO4–K2HPO4緩沖溶液體系中，硫化氫與汞結(jié)合形成硫化汞，導(dǎo)致熒光素汞的熒光猝滅，在2.32×10-7～1.0

3、5×10-6mol·L-1濃度范圍內(nèi)，體系的熒光猝滅強(qiáng)度（ΔF值）與硫化氫濃度之間具有良好的線性關(guān)系，線性回歸方程為ΔF=29.04 c+6.89（c，×10-7mol·L-1），相關(guān)系數(shù)r=0.9986。檢出限為6.97×10-8mol·L-1。測(cè)定細(xì)胞培養(yǎng)液樣品中生物信使分子硫化氫的加標(biāo)回收率為91.47％~106.84%。方法靈敏，操作簡便，用于樣品中生物信使分子硫化氫的測(cè)定，結(jié)果滿意。
　　2-(2-吡啶基)苯并咪唑（2-

4、PBI）是一種熒光配體，具有強(qiáng)熒光；Hg2+-2-PBI是一種非熒光配合物—熒光熄滅體。
　　本文第三章用NaOH溶液吸收內(nèi)源性H2S，轉(zhuǎn)化形成的S2-與Hg2+-2-PBI作用，生成HgS，釋放出2-PBI，待測(cè)體系產(chǎn)生熒光。測(cè)定體系的熒光強(qiáng)度，標(biāo)準(zhǔn)曲線法定量樣品中生物信使分子硫化氫的含量。建立了生物信使分子硫化氫的熒光分光光度檢測(cè)新方法。
　　在優(yōu)化的實(shí)驗(yàn)條件下，H2S的濃度為6.39×10-7～3.64×10-6mol

5、·L-1時(shí)，體系的ΔF值與H2S濃度之間的線性關(guān)系為ΔF=71.33c－3.6228（c，10-6mol·L-1），r=0.9991。檢出限為1.92×10-7mol·L-1。細(xì)胞培養(yǎng)液樣品測(cè)定的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差為0.28％～0.94％，加標(biāo)回收率為97.2%~103.1%。方法靈敏，操作簡便。用于生物信使分子H2S的測(cè)定，結(jié)果滿意。
　　本文第四部分對(duì)B-R緩沖溶液-CPC表面活性劑介質(zhì)中的甲酚紫高氯酸鹽進(jìn)行了同步掃描研究，應(yīng)用三維

6、熒光和吸收光譜分析了同步掃描光譜的共振熒光特性；基于三聚氰胺對(duì)甲酚紫高氯酸鹽的共振熒光強(qiáng)度的抑制作用，建立了阻抑共振熒光測(cè)定三聚氰胺的分析新方法。在9.6×10-8～2.8×10-6mol·L-1濃度范圍內(nèi)，體系的ΔF值與三聚氰胺濃度之間具有良好的線性關(guān)系，線性回歸方程為ΔF=106.59c－5.44（c,10-6mol·L-1），相關(guān)系數(shù)r=0.9993。檢出限為2.87×10-8mol·L-1。奶粉樣品測(cè)定的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差為1.9％～