用酶法評(píng)定鴨飼料代謝能的方法學(xué)研究.pdf

1、本研究根據(jù)鴨在常態(tài)條件下小腸液中消化酶酶譜的變異幅度，設(shè)計(jì)了與鴨小腸液中消化酶活性近似的人工小腸液，建立了以胃蛋白酶—人工鴨小腸液兩步酶水解法估測(cè)鴨飼料代謝能值的離體評(píng)定方法，為構(gòu)建我國(guó)水禽飼養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)的有效能值參數(shù)提供了現(xiàn)代化的測(cè)定手段。全文分為五部分： 第一部分：模擬鴨小腸液酶譜首先需要在克服應(yīng)激條件下獲得足夠量的小腸液的手段，關(guān)鍵技術(shù)是采集食糜的T型套管設(shè)計(jì)。本試驗(yàn)在參照豬、牛、羊小腸套管的基礎(chǔ)上優(yōu)選出了可持續(xù)采集食糜的專用套

2、管及配套的食糜采集的方法。結(jié)果表明，本試驗(yàn)設(shè)計(jì)的套管對(duì)腸道的損傷輕微，腸道與腹脂的粘連率少。試驗(yàn)鴨安裝套管后15天內(nèi)能恢復(fù)到術(shù)前體重。經(jīng)套管收集的食糜量平均可達(dá)20.2ml/h。 第二部分：為了獲得一般生產(chǎn)條件下，鴨小腸液消化酶酶譜的變異幅度，就通過(guò)簡(jiǎn)單T型套管獲得有代表性腸液的采樣方案及日糧營(yíng)養(yǎng)水平對(duì)鴨小腸液消化酶活性的影響進(jìn)行了研究。結(jié)果表明，北京鴨在自由采食、飲水的條件下，小腸液中消化酶活性具有晝夜節(jié)律及日間變化。代表性腸

3、液的采樣方案為，采樣時(shí)間為9∶30～18∶30，每次采集1h，每次采樣后間隔3h，然后重復(fù)采樣過(guò)程。一天共采集3次，隔日重復(fù)采樣過(guò)程1次，共采集3天。日糧能量水平對(duì)鴨小腸液消化酶活性沒(méi)有顯著地影響，而蛋白質(zhì)水平對(duì)小腸液中淀粉酶、胰蛋白酶、糜蛋白酶有顯著地影響。在一般生產(chǎn)條件下，北京鴨空腸液中消化酶活性的變異范圍分別為：淀粉酶308.26～408.15U/ml，胰蛋白酶74.51～101.77U/ml，糜蛋白酶32.14～48.20U/m

4、l，脂肪酶0.79～1.22U/ml，蔗糖酶5.27～5.41U/ml，麥芽糖酶24.57～30.32U/ml。 第三部分：為了確定胃蛋白酶—人工鴨小腸液的最適酶水解條件參數(shù)，就胃蛋白酶、人工鴨小腸液酶水解的溫度、時(shí)間、pH等條件進(jìn)行了研究。結(jié)果表明，酶水解法中，胃蛋白酶的濃度及人工腸液中酶的種類及活性可以代表鴨胃腸道中參與飼料消化的主要消化酶的生理水平。胃蛋白酶的適宜水解時(shí)間為3小時(shí)，水解溫度為38℃。人工小腸液酶水解的最適p

5、H為6.6，適宜水解時(shí)間為22小時(shí)。 第四部分：為了通過(guò)酶水解物總能值(EHGE)估測(cè)鴨飼料的生物學(xué)法代謝能值，以玉米為例研究了以酶法測(cè)值估測(cè)生物學(xué)法代謝能值的數(shù)學(xué)模型。結(jié)果表明，以玉米酶法測(cè)值回歸校正到鴨排空強(qiáng)飼法代謝能值的數(shù)學(xué)模型為：AME=2.639+0.897×EHGE(CF＜2.8)，AME=3.890+0.788×EHGE(CF＞2.8)(P＜0.01；RSD=0.166MJ/Kg)；TME=3.625+0.905×

6、EHGE(CF＜2.8)，TME=4.950+0.792×EHGE(CF＞2.8)(P＜0.01；RSD=0.166MJ/Kg)。酶法AME估測(cè)值與生物學(xué)法的偏差范圍為-0.353MJ/Kg～0.343MJ/Kg，TME的偏差范圍為-0.371MJ/Kg～0.335MJ/Kg。用酶法估測(cè)玉米的代謝能值可以達(dá)到與生物學(xué)法類似的精度。且酶法的估測(cè)精度明顯地高于化學(xué)法。 第五部分：以玉米為例檢驗(yàn)了酶法估測(cè)鴨飼料代謝能值的精度及重演性。