黑木耳多糖分子修飾及功能與應(yīng)用研究.pdf

1、本文以黑木耳多糖為對(duì)象，系統(tǒng)地研究了其分級(jí)方法以及分子修飾(硫酸酯化、超聲波輻射降解與過渡金屬離子的相互作用)方法，通過對(duì)黑木耳多糖及其分子修飾多糖功能(抗氧化、抗腫瘤、抗凝血)研究，并探索其在膜材料上的應(yīng)用，為黑木耳多糖、修飾多糖在醫(yī)藥、保健品、食品及膜材料等方面的應(yīng)用奠定基礎(chǔ)。得到以下主要結(jié)果： 1、用陽離子表面活性劑十六烷基三甲基溴化銨(CTAB)對(duì)黑木耳多糖進(jìn)行分級(jí)，得到黑木耳中性多糖和酸性多糖(AAP)兩部分，其中酸性

2、多糖含量占80.33％，中性多糖占18.67％。用乙醇將黑木耳多糖分為AAP1、AAP2、AAP3三部分。 2、確定了黑木耳多糖的最佳硫酸酯化工藝：氯磺酸與吡啶體積比5∶1；多糖溶液與酯化試劑的體積2∶1；酯化溫度為50℃，酯化反應(yīng)時(shí)間為1.5h。FTIR光譜顯示硫酸基與AAP形成硫酸酯化合物。并制備了取代度分別為0.32、0.64、1.0的三個(gè)黑木耳多糖硫酸酯AAP-S1、AAP-S2、AAP-S3。 3、黑木耳多糖(

3、AAP)對(duì)ZnSO4·7H2O中Zn(Ⅱ)的螯合能力最強(qiáng)，其最佳螯合工藝為：Zn(Ⅱ)的初始濃度為3mg/mL、pH值為4.0、黑木耳多糖與Zn(Ⅱ)的比值為4∶1、螯合6h。制備了黑木耳多糖(AAP)與5種過渡金屬離子(Fe2+、Co2+、Ni2+、Cu2+、Zn2+)的螯合物。 4、黑木耳多糖經(jīng)超聲波輻射降解后，隨時(shí)間的增加，黏度逐步降低、溶解性增加，葡萄糖醛酸含量基本保持不變。黑木耳多糖經(jīng)超聲波輻射20min、40min、

4、60min后，制備了三種多糖AAP-US1、AAP-US2、AAP-US3。 5、硫酸酯化黑木耳多糖對(duì)金黃色葡萄球菌、大腸桿菌有不同程度的抑制，抑制作用可達(dá)16～20h。對(duì)黑曲霉的孢子萌發(fā)也有一定的抑制現(xiàn)象。 ()AAP-S有直接清除氧自由基及提高機(jī)體抗氧化的功能。在生物體內(nèi)可以通過顯著地提高SOD、GSHPX、T-AOC的活力，降低MDA的含量，提高機(jī)體非特異性免疫器官—胸腺、脾臟的重量等作用，達(dá)到清除自由基的功能。

5、 硫酸酯化黑木耳多糖對(duì)腫瘤細(xì)胞表現(xiàn)出顯著的抑制功能，并表現(xiàn)出量效關(guān)系，對(duì)癌細(xì)胞的最大抑制率出現(xiàn)在72h，可達(dá)49.6％?？鼓钚源嬖诹啃шP(guān)系，并隨硫酸化取代度的增加，抗凝血活性逐漸增強(qiáng)。 6、超聲波改性黑木耳多糖對(duì)除羥自由基、超氧離子自由基均有一定的清除作用；對(duì)小鼠的生長無明顯不良影響，并可以顯著地促進(jìn)胸腺和脾臟的生長；可以不同程度地提高小鼠血清T-AOC的能力、升高SOD、GSH-PX的活力、降低MDA含量。其抗氧化能

6、力呈量效關(guān)系，即隨劑量的增加，抗氧化能力逐漸提高。 7、硫酸酯化黑木耳多糖(AAP-S)、黑木耳多糖的金屬鱉合物(AAP-Ms)可以使DNA和EB/DNA體系的吸收峰發(fā)生位移(紅移和藍(lán)移)，AAP-Fe2+＞AAP-Co2+＞AAP-Ni2+＞AAP-Cu2+，并且為藍(lán)移，分別位移了19nm、4nm、1nm、1nm；而AAP-Zn2+則發(fā)生紅移，位移距離為1nm，體現(xiàn)了與EB/DNA作用的方式有所不同；并使DNA和EB/DNA體

7、系的吸收峰產(chǎn)生增色效應(yīng)。表明AAP-Ms與DNA堿基對(duì)作用距離很近，可能存在嵌插作用。 8、黑木耳多糖對(duì)小鼠的創(chuàng)傷止血試驗(yàn)表明，乙醇分級(jí)黑木耳多糖的級(jí)分AAP1具有一定的止血作用。黑木耳多糖有很好的成膜性能，當(dāng)海藻酸鈉的加入量為40％時(shí)，黑木耳多糖膜的拉伸強(qiáng)度和斷裂伸長率到達(dá)較好狀態(tài)，其值分別達(dá)到27.4Mpa和21.3％，比純黑木耳多糖分別提高153.7％、55.4％。當(dāng)加入量為30％時(shí)，共混膜的水蒸氣透過率，達(dá)到最小值，其值