野生黑木耳多糖的提取及性質(zhì)研究.pdf

1、本學(xué)位論文在對(duì)野生黑木耳與栽培黑木耳的蛋白質(zhì)、脂肪、總糖等營(yíng)養(yǎng)成分及多糖含量進(jìn)行了分析比較的基礎(chǔ)上，對(duì)野生黑木耳多糖的提取、純化、理化性質(zhì)、單糖組分等進(jìn)行了研究，并就野生黑木耳多糖對(duì)實(shí)驗(yàn)性高脂血癥小鼠的降脂作用進(jìn)行了實(shí)驗(yàn)觀(guān)察。主要試驗(yàn)結(jié)果如下： 1、野生黑木耳的蛋白質(zhì)、脂肪、總糖、多糖含量分別比栽培黑木耳高0.70％、0.06％、1.40％、2.69％；野生黑木耳的水分、灰分和粗纖維含量分別比栽培黑木耳低0.26％、0.85％和

2、1.19％。經(jīng)SAS分析，蛋白質(zhì)、脂肪、總糖和多糖含量差異不顯著，水分含量差異顯著，灰分含量和粗纖維含量都達(dá)到極顯著差異。野生黑木耳的維生素C、維生素B1和維生素B2含量分別比栽培黑木耳高6.8mg.(100g)-1、0.17mg.(100g)-1和0.052mg.(100g)-1。但野生黑木耳鐵、硒、鈣、鋅的含量分別比栽培黑木耳低0.13mg.g-1、0.005ug.g-1、118.59mg.kg-1、2.58mg.kg-1，經(jīng)SAS

3、分析，除鐵的含量差異不顯著外，其余都達(dá)到顯著差異。 2、采用熱水浸提、醇沉法提取野生黑木耳多糖，對(duì)野生黑木耳多糖提取工藝和一般理化性質(zhì)進(jìn)行了研究。選擇浸提固液比、溫度、時(shí)間和浸提次數(shù)作為單因素進(jìn)行梯度實(shí)驗(yàn)，確定其條件范圍，再通過(guò)正交實(shí)驗(yàn)L9(34)進(jìn)一步確定野生黑木耳水溶性多糖最佳提取工藝條件。結(jié)果表明最佳提取工藝為：固液比1：40、浸提溫度85℃、浸提時(shí)間2h、反復(fù)浸提2次。理化性質(zhì)結(jié)果表明：提取的野生黑木耳多糖中含有多肽和A

4、A，為蛋白質(zhì)復(fù)合多糖。 3、采用微波法輔助提取野生黑木耳多糖，改進(jìn)了傳統(tǒng)的浸提工藝，通過(guò)單因素和正交實(shí)驗(yàn)確定微波輔助提取的最佳工藝條件。結(jié)果表明：采用水作為提取劑、微波功率為560W、提取時(shí)間為35s、料液比為1：40、萃取時(shí)間為3h浸提效果最佳，多糖提取率達(dá)98.55％。與傳統(tǒng)的浸提法相比，時(shí)間由24h縮短為30s+3h，多糖產(chǎn)率為7.12％，微波輔助提取多糖具有時(shí)間短、耗能低、提取率高等優(yōu)點(diǎn)。 4、用兩種方法(氯仿-

5、正丁醇法和三氯乙酸-正丁醇法)脫除野生黑木耳粗多糖中的蛋白質(zhì)，以脫蛋白率為指標(biāo)，通過(guò)正交實(shí)驗(yàn)L9(34)確定最佳脫蛋白分離工藝，對(duì)比兩種方法中最佳組合粗多糖得率的差異。結(jié)果表明：三氯乙酸-正丁醇法比氯仿-正丁醇法的脫蛋白效果好，最佳水平脫蛋白率為70.69％，但樣品中多糖損失較前者嚴(yán)重，多糖得率僅為67.87％；氯仿-正丁醇法最佳水平脫蛋白率為51.39％，多糖得率為80.31％。活性炭脫色正交試驗(yàn)結(jié)果：活性炭添加量6％，脫色溫度為40

6、℃，脫色時(shí)間為20min。雙氧水脫色試驗(yàn)結(jié)果：雙氧水濃度選用20％為好。兩種方法處理對(duì)脫色效果差異不顯著，對(duì)多糖得率有極顯著的差異。因此，選用雙氧水脫色效果較好。脫色脫蛋白后的多糖，經(jīng)透析法除去小分子雜質(zhì)，經(jīng)醇沉淀、離心、冷凍干燥得純多糖。純多糖經(jīng)酸水解后制成多糖水解液，用紙色譜法進(jìn)行單糖組分分析。結(jié)果表明：野生黑木耳多糖由半乳糖和木糖兩種單糖組成，Rf值分別是：0.36和0.44。 5、探討野生黑木耳多糖(WAAU)對(duì)小鼠誘導(dǎo)

7、型高脂血癥降脂作用的影響。選用雄性昆明小鼠70只，經(jīng)高脂飼料誘導(dǎo)成高脂血癥模型，按體重和血清總膽固醇水平均衡分為7組，其中6個(gè)實(shí)驗(yàn)組分別經(jīng)胃灌注一定量的WAAU多糖，每天一次，連續(xù)30天，對(duì)照組用等劑量的蒸餾水代替，觀(guān)察WAAU多糖對(duì)小鼠體重，食量的影響及每周測(cè)定血漿脂質(zhì)變化。結(jié)果表明：注射量在5％以上時(shí)小鼠的血清總膽固醇(TC)、血清甘油三脂(TG)顯著降低(p＜0.05)和血清高密度膽固醇(HDL-c)30后有顯著升高(p＜0.05