葡萄糖-6-磷酸脫氫酶在臨床相關(guān)疾病中的診斷價(jià)值及應(yīng)用前景.pdf

1、葡萄糖-6-磷酸脫氫酶(G6PD)缺乏的分子基礎(chǔ)是G6PD基因突變,它是一種X連鎖的不完全顯性遺傳病,也是發(fā)生頻率最高的遺傳性疾病之一.G6PD基因突變具有明顯的地域和人種差異,如:G6PD基因中G1376T、G1388A和A95G突變就是中華民族所獨(dú)有的突變型,也是中國(guó)人中最為常見的突變類型.G6PD是磷酸戊糖途徑的限速酶,機(jī)體依賴該途徑提供主要的還原當(dāng)量NADPH,而NADPH又作為生物體內(nèi)許多重要酶作用的輔基,參與氧化-還原、生物

2、合成、生物解毒及細(xì)胞分化等,故G6PD基因突變必然產(chǎn)生連瑣病理反應(yīng),導(dǎo)致許多臨床相關(guān)疾病.此外,最新研究還顯示,G6PD也參與了腫瘤的形成,可能作為參與腫瘤發(fā)生的一個(gè)候選基因.我們認(rèn)為G6PD在細(xì)胞癌變和轉(zhuǎn)化的分子機(jī)制中有著特殊的表現(xiàn),可能作為這些細(xì)胞的特征在腫瘤的實(shí)驗(yàn)診斷中具有潛在價(jià)值.該論文共分三部分分別研究如下:一、中國(guó)常見的G6PD基因突變型分析及特異性診斷技術(shù)的建立該部分研究是基于熒光共振能量轉(zhuǎn)移的原理,在LightCycle

3、r熒光定量PCR儀上進(jìn)行的.我們首先設(shè)計(jì)了一對(duì)檢測(cè)G6PD基因A95G突變的熒光雜交探針,在熔解曲線模式下,設(shè)定不同模板量、Mg<'2+>濃度,觀察熔解曲線峰面積及Tm值的變化.二、G6PD基因突變與血細(xì)胞功能異常 鑒于G6PD的重要生理功能,G6PD基因突變勢(shì)必導(dǎo)致細(xì)胞的功能異常,此部分我們對(duì)G6PD缺乏患者的紅細(xì)胞、白細(xì)胞部分功能改變進(jìn)行了研究.三、G6PD對(duì)腫瘤細(xì)胞增殖、分化及抗氧化能力的影響 我們?cè)隗w外培養(yǎng)Raii細(xì)胞,分別用不