金針菇(Flammulina velutipes)中鋅的形態(tài)分析及鋅多糖的結(jié)構(gòu)和抗氧化活性研究.pdf

1、金針菇中含有豐富的多糖并且鋅含量較高，其中35％左右的鋅與多糖結(jié)合。近幾年來(lái)，國(guó)內(nèi)外已有研究人員對(duì)鋅多糖進(jìn)行了初步的分析，研究大多都停留在鋅多糖的生物利用以及鋅的總量測(cè)定等方面，對(duì)于鋅多糖結(jié)構(gòu)特征以及免疫功能活性的研究報(bào)道較少。因此，對(duì)金針菇鋅多糖進(jìn)行研究，分析其初級(jí)結(jié)構(gòu)，評(píng)價(jià)其抗氧化活性，為豐富及開(kāi)發(fā)金針菇鋅多糖功能性產(chǎn)品以及拓寬其應(yīng)用范圍奠定了良好的基礎(chǔ)。主要的研究結(jié)果如下:
　　1、通過(guò)單因素和正交實(shí)驗(yàn)優(yōu)化了金針菇中鋅多糖的

2、水浴提取條件。結(jié)果表明，鋅多糖的最佳提取條件是:提取溫度75℃，時(shí)間120 min，料液比1∶30。在最優(yōu)的提取條件下，金針菇粉中鋅元素的含量為34.43μg/g。
　　2、通過(guò)樣品的溶解、浸提、0.45μm的微孔濾膜過(guò)濾、D101大孔樹(shù)脂分離等手段，得到了鋅的可溶態(tài)和懸浮態(tài)以及有機(jī)態(tài)、無(wú)機(jī)態(tài)等四種形態(tài)，進(jìn)一步通過(guò)不同提取分離方法獲得了鋅多糖、鋅蛋白兩種有機(jī)鋅結(jié)合態(tài)。金針菇中鋅的提取率達(dá)到76.34％;在鋅的可溶態(tài)溶液中，有機(jī)態(tài)鋅

3、和無(wú)機(jī)態(tài)鋅的提取率分別是43.36％和23.90％;在鋅的有機(jī)態(tài)溶液中，鋅多糖和鋅蛋白的提取率分別是14.86％和10.64％。
　　3、經(jīng)過(guò)熱水浸提、Sevage試劑脫蛋白以及醇沉后得到鋅多糖粗品，粗品的提取率為6.67％，總糖含量為72.37％，鋅得率為140μg/g，采用DEAE纖維素-52和Sephadex G-100型凝膠色譜對(duì)粗品進(jìn)行逐步分離、純化，得到兩個(gè)組分CF1、CF2。兩個(gè)組分的定性實(shí)驗(yàn)及紫外光譜分析結(jié)果表明C

4、F1、CF2兩種鋅多糖樣品中均不含有淀粉、酚類(lèi)物質(zhì)等雜質(zhì)。高效凝膠過(guò)濾色譜進(jìn)一步證明了兩個(gè)樣品為純度較高的單一多糖組分，測(cè)得它們的平均相對(duì)分子質(zhì)量分別為890 KDa，1244 KDa。CF1、CF2分別占鋅多糖粗品的20.97％與12.25％，總糖含量分別為97.32％，96.58％，通過(guò)火焰原子吸收法測(cè)得每克鋅多糖純品中分別含有鋅191μg，429μg，鋅含量的差異與組分結(jié)構(gòu)有關(guān)，這為進(jìn)一步研究和比較關(guān)于不同鋅含量純化組分的結(jié)構(gòu)特征

5、和活性分析奠定了良好的基礎(chǔ)。
　　4、分別測(cè)定了兩個(gè)純化組分的單糖組成，結(jié)果表明CF1組分由甘露糖、葡萄糖、葡萄糖醛酸、木糖、半乳糖、巖藻糖六種單糖組成，組成比例為7.15∶77.28∶1.77∶0.89∶9.20∶3.66。CF2組分主要由甘露糖、葡萄糖醛酸、鼠李糖、葡萄糖、半乳糖醛酸、阿拉伯糖、半乳糖、巖藻糖等八種糖組成，組成比例為9.45∶1.10∶0.82∶9.66∶13.08∶0.89∶2.40∶62.49。
　　

6、5、通過(guò)對(duì)金針菇鋅多糖進(jìn)行紅外光譜掃描和核磁共振實(shí)驗(yàn)，結(jié)果表明CF1主要以β型呋喃糖為主，也存在少量α型吡喃糖苷糖。CF2主要以β型吡喃糖為主，包括β-D-葡萄糖及β-D-甘露糖，也含有少量的α型吡喃糖苷鍵。在1640 cm-1附近的峰向低頻波數(shù)移動(dòng)表明鋅可能與-NH2形成配位鍵，1100-1010 cm-1之間吸收峰的紅移現(xiàn)象表明鋅與多糖可能是以螯合態(tài)形式存在的。兩個(gè)組分均具有三股螺旋結(jié)構(gòu)，是標(biāo)準(zhǔn)的非晶體結(jié)構(gòu)，并且分析表明多糖中的微量