肉蓯蓉多糖及其鋅配合物的制備、結(jié)構(gòu)表征及抗氧化活性研究.pdf

1、列當(dāng)科寄生植物肉蓯蓉(Cistanche deserticola Y.C.Ma)，廣泛分布于非洲和亞洲西部，其干燥帶鱗葉的肉質(zhì)莖被傳統(tǒng)用于促進血液循環(huán)、治療陽痿、治療腰痛及不孕不育等。肉蓯蓉中含有苯乙醇苷類、多糖、木脂素、酚類等活性成分，具有抗氧化、降血糖、降血脂、抗腫瘤等藥理活性，目前研究主要集中在肉蓯蓉苯乙醇苷類物質(zhì)，關(guān)于肉蓯蓉多糖研究的報道少。因此，本文以肉蓯蓉屬中的管花肉蓯蓉肉質(zhì)莖為原料，采用響應(yīng)面分析法(RSM)優(yōu)化其粗多糖的

2、超聲酶法輔助提取工藝，獲得最佳提取工藝;采用紅外光譜(FT-IR)、圓二色譜(CD)、原子力顯微鏡(AFM)、掃描電鏡(SEM)及氣相色譜(GC)等方法比較不同提取方法獲得的粗多糖的結(jié)構(gòu)特征并研究其抗氧化活性;采用季銨鹽沉淀法對粗多糖的精制工藝進行研究，獲得最佳精制條件;采用肉蓯蓉精制多糖與硫酸鋅反應(yīng)制備肉蓯蓉多糖鋅配合物，并研究其結(jié)構(gòu)和抗氧化活性。主要研究內(nèi)容和結(jié)果如下:
　　1、肉蓯蓉肉質(zhì)莖的成分分析及其粗多糖的超聲酶法輔助提

3、取工藝研究。采用國標(biāo)法對肉蓯蓉莖進行基本成分分析，結(jié)果表明，其水分、灰分、粗蛋白、粗脂肪及總糖含量分別為:4.40％、3.32％、7.69％、1.18％及45.35％。采用RSM法優(yōu)化了肉蓯蓉粗多糖的提取工藝，最佳提取工藝條件為:纖維素酶添加量2.5％，反應(yīng)pH值5.2，超聲溫度54.1℃C，超聲時間31.5 min，該工藝條件下，肉蓯蓉粗多糖得率和含量分別為22.31％和48.50％。與常規(guī)熱水法提取相比，超聲酶法輔助提取粗多糖得率提

4、高了44.96％，且提取時間短，能耗低，在粗多糖提取方面有較好的應(yīng)用前景。
　　2、肉蓯蓉粗多糖的初步表征及抗氧化活性研究。采用FT-IR、CD、AFM、SEM及GC等現(xiàn)代分析方法，對常規(guī)熱水法、酶輔助法、超聲輔助法及超聲酶輔助法提取的四種粗多糖HWEP、EAEP、UAEP及UCEP進行研究，F(xiàn)T-IR分析表明，不同方法分離獲得的四種粗多糖主要官能團基本相似;SEM和AFM結(jié)果表明，與HWEP相比，EAEP、UAEP及UCEP的表

5、面形態(tài)均發(fā)生改變;GC分析表明，不同方法分離獲得的四種粗多糖單糖組成相同，均由鼠李糖、甘露糖、葡萄糖和半乳糖組成，其摩爾比分別為1.86∶1∶17.08∶1.74，4.97∶1∶12.42∶1.31，3.79∶1.24∶17.91∶1和2.18∶1∶28.29∶1.43。體外抗氧化活性研究表明，不同提取方法獲得的四種粗多糖對DPPH、OH及ABTS自由基均有一定的清除能力，其中UCEP對DPPH自由基清除活性最高，多糖濃度為1000μg

6、/ml時清除率達到84.59％，常規(guī)熱水法得到的多糖對OH自由基和ABTS自由基清除活性最高，多糖濃度為1000μg/ml時清除率分別為60.45％和86.36％。
　　3、UCEP的精制、精制組分鋅配合物的制備、結(jié)構(gòu)表征及抗氧化活性研究。優(yōu)化了UCEP的季銨鹽沉淀法，其最佳精制條件為:CTAB濃度為3.0％，粗多糖濃度為0.8％，該條件下，精制多糖(UCEP1)得率和含量分別為44.09％和70.13％。采用UCEP1與硫酸鋅制

7、備得多糖鋅配合物(UCEP1-Zn)，EDTA滴定法分析其鋅含量為7.57％;FT-IR分析表明，UCEP1中-OH和-COO-和Zn2+發(fā)生了配位;CD分析表明UCEP1-Zn形成后，多糖鏈構(gòu)象發(fā)生變化;AFM及SEM分析表明UCEP1-Zn形成后，多糖分子間及表面形貌發(fā)生變化;XRD分析表明鋅與肉蓯蓉多糖經(jīng)過配位作用形成了一種新的化合物。體外抗氧化活性研究表明，UCEP1-Zn的抗氧化能力顯著高于UCEP1，且對ABTS自由基清除活