CD4+CD25+調(diào)節(jié)性T細(xì)胞在煙霧暴露小鼠肺氣腫和肺纖維化模型中的作用和機(jī)制.pdf

1、第一部分實(shí)驗(yàn)型煙霧暴露小鼠肺氣腫和肺纖維化模型的建立 目的：建立煙霧暴露小鼠肺氣腫和肺纖維化模型，為探討CD4+CD25+調(diào)節(jié)性T細(xì)胞(CD4+CD25+Treg在其發(fā)病機(jī)制中作用奠定基礎(chǔ)。 方法：24只健康雄性昆明小鼠(18-20g)隨機(jī)分為單純熏煙組(A組)，使用預(yù)防性抗炎劑(己酮可可堿)誘導(dǎo)的小鼠(B組)和正常對(duì)照組(C組)三組。A組和B組分別用自制熏箱煙霧暴露4個(gè)月；C組不作任何干預(yù)，同等條件下飼養(yǎng)4個(gè)月。以蘇木

2、精—伊紅(HE)染色后觀察各組肺部組織病理改變。以平均線性截距(Lm)評(píng)估肺氣腫程度，按Maeyama方法對(duì)肺泡炎和纖維化進(jìn)行評(píng)估，采用分光光度法測(cè)定肺組織勻漿羥脯氨酸含量。 結(jié)果：A組出現(xiàn)類肺氣腫改變，Lm與B組及正常對(duì)照組相比差異有顯著性(P均＜0.05)。B組以肺纖維化為主。B組肺組織勻漿羥脯氨酸含量與A組和正常對(duì)照組具有顯著性差異(P＜分別0.05，0.01)。以上表明本研究模型成功。 結(jié)論：煙霧暴露16周可以復(fù)

3、制出小鼠肺氣腫和肺纖維化模型。兩模型為研究CD4+CD25+調(diào)節(jié)性T細(xì)胞在其發(fā)病中作用和機(jī)制奠定了良好基礎(chǔ)。 第二部分CD4+CD25+調(diào)節(jié)性T細(xì)胞在煙霧暴露小鼠肺氣腫和肺纖維化模型中的作用和機(jī)制 目的：揭示Th1極化和Th2極化在小鼠肺氣腫和肺纖維化中的作用并進(jìn)一步探討CD4+CD25+調(diào)節(jié)性T細(xì)胞在其發(fā)病機(jī)制中作用。 方法：收集各組支氣管肺泡灌洗液(BALF)行細(xì)胞計(jì)數(shù)和分類，并用酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)

4、檢測(cè)BALF中IFN-γ和IL-13的含量；酶聯(lián)免疫吸附法檢測(cè)肺組織IL-10含量；分離制備小鼠脾單細(xì)胞懸液，用流式細(xì)胞儀檢CD4+CD25+調(diào)節(jié)性T細(xì)胞占CD4+細(xì)胞的比例。用SPSS11.5軟件包進(jìn)行組間方差分析和相關(guān)分析。 結(jié)果：肺氣腫組和肺纖維化組BALF中細(xì)胞總數(shù)均顯著高于正常對(duì)照組(P均＜0.01)；肺氣腫組BALF中，中性粒細(xì)胞和巨噬細(xì)胞的總數(shù)顯著高于正常對(duì)照組(P均＜0.05)，肺纖維化組BALF中，中性粒細(xì)胞和

5、淋巴細(xì)胞均顯著高于正常對(duì)照組(P＜均0.01)；肺氣腫組BALF中IFN-γ含量顯著高于正常對(duì)照組和肺纖維化(P分別＜0.01，0.05)；肺纖維化組BALF中IL-13含量顯著高于正常對(duì)照組和肺氣腫組(P均＜0.05)；肺纖維化組CD4+CD25+所占百分率顯著高于正常對(duì)照組(P＜0.03)，肺氣腫組CD4+CD25+所占百分率顯著低于正常對(duì)照組(P＜0.05)；肺纖維化組肺組織IL-10含量顯著高于正常對(duì)照組(P＜0.05)，肺氣腫