CD4+CD25+調節(jié)性T細胞在PCV2持續(xù)性感染中的作用.pdf

1、豬圓環(huán)病毒2型(porcine circovirus type2，PCV2)引起的豬圓環(huán)病毒相關疾?。≒CV2-associated diseases，PCVAD）是危害當今世界養(yǎng)豬生產的重要傳染病之一。PCV2可以導致豬的免疫功能抑制并且在宿主體內持續(xù)性感染。但目前對PCV2持續(xù)性感染的機制了解仍然不夠。CD4+CD25+調節(jié)性T細胞(regulatory T cells，Tregs)在病原微生物致病和持續(xù)性感染中發(fā)揮著雙重作用。本文

2、擬通過動物實驗，分析CD4+CD25+調節(jié)性T細胞的改變對機體免疫功能及病毒感染狀態(tài)的影響，詮釋CD4+CD25+調節(jié)性T細胞在PCV2持續(xù)性感染中的作用。
　　將168只6周齡雌性BALB/c小鼠隨機分為4組，即空白對照組(Blank)、PCV2組(PCV2)、Foxp3-shRNA+PCV2組(shRNA+PCV2)和pcDNA3.1-Foxp3+PCV2組(Foxp3+PCV2)，每組42只。除Blank組外，其余各組均通過

3、腹腔感染1.0x105.7 TCID50PCV2;于感染前2d與感染后12d，shRNA+PCV2組和Foxp3+PCV2組分別接種表達Foxp3-shRNA和表達Foxp3的真核質粒（100μg/只）。感染后PCV2組與Foxp3+PCV2組的Foxp3基因的平均表達量高于shRNA+PCV2和空白對照組的表達量，F(xiàn)oxp3+PCV2組肺臟內的病毒載量高于PCV2組和shRNA+PCV2組。
　　PCV2感染后4d，CD4+和C

4、D8+T細胞的特異增殖能力均下降，F(xiàn)oxp3表達量的增加可暫時提高CD4+T細胞的特異增殖能力，但對CD8+T細胞的特異增殖能力具有長期抑制作用。PCV2對CD4+CD25+調節(jié)性T細胞的增殖活性影響不顯著，當增加Foxp3的表達時，僅能短暫地提高CD4+CD25+調節(jié)性T細胞的特異增殖活性。進一步應用ELISA檢測血清中細胞因子水平的結果顯示，PCV2感染引起IFN-γ的水平降低，F(xiàn)oxp3+PCV2組和PCV2組的IL-10、TGF

5、-β1、IL-17A濃度顯著高于空白組和shRNA+PCV2組的水平(P＜0.05)。流式細胞術分析結果表明，PCV2引起感染初期脾臟內CD3+CD4+CD8-、CD3-CD4-CD8+細胞含量下降，導致CD3+CD4-CD8+和CD3+CD4+CD8+T細胞亞群平均含量下降，但CD4+CD25+CD127Low調節(jié)性T細胞亞群的平均含量上升。Foxp3表達量的增加可使CD3+CD4+CD8-T細胞、CD3+CD4-CD8+T細胞和CD

6、3+CD4+CD8+T細胞亞群的進一步短暫降低。當抑制Foxp3表達時，CD3-CD4-CD8+細胞含量則上升。
　　PCV2可以引起CD4+CD25+Tregs數(shù)量增加，促進IL-10、TGF-β1和IL-17A的分泌;當增加Foxp3表達量時，肺臟內的PCV2載量升高，機體的特異和固有細胞免疫進一步被抑制。CD4+CD25+Tregs在PCV2持續(xù)性感染過程中發(fā)揮了重要作用。該研究結果為進一步闡明PCV2的致病機制提供了重要科