氯喹防治CpG DNA介導SIRS的實驗研究.pdf

1、目的全身炎癥反應綜合征(Systemic inflammatory response syndrome,SIRS)是嚴重燒傷、創(chuàng)傷的常見并發(fā)癥,病死率較高,進一步研究SIRS的發(fā)病機制及防治措施迫在眉睫.氯喹已有60多年的臨床應用歷史,是治療瘧疾癥狀發(fā)作的最有效的藥物.氯喹還用于治療一些自身免疫性疾病如類風濕性關節(jié)炎、紅斑狼瘡等,作用機制可能與其抑制單核/巨噬細胞釋放致炎細胞因子如TNF-α、IL-6等有關.該研究旨在明確氯喹對SIRS

2、模型小鼠的保護作用的基礎上,研究氯喹拮抗SIRS的作用機制,為氯喹的老藥新用提供實驗依據(jù).方法①建立小鼠SIRS模型,觀察氯喹的保護作用;②分離人外周血單個核細胞(hPBMC),用細菌DNA、CpG ODN和LPS誘導hPBMC釋放TNF-α和IL-6,觀察氯喹的抑制作用,并明確其量效、時效關系;ELISA法檢測培養(yǎng)上清TNF-α和IL-6的含量;③流式細胞術觀察氯喹對6-FAM CpG ODN在人單核細胞內(nèi)聚集的影響,闡明氯喹對細胞內(nèi)

3、體成熟的抑制作用;④電泳遷移率改變分析(EMSA)方法觀察氯喹對細胞NF-κB激活的抑制作用.結果①30mg/kg氯喹顯著降低細菌DNA、CpG ODN、LPS和滅活大腸桿菌攻擊小鼠的死亡率,死亡率由90﹪降低至50﹪、85﹪降低至45﹪、95﹪降低至65﹪以及90﹪降低至60﹪;②氯喹抑制細菌DNA、CpG ODN和LPS誘導hPBMC釋放TNF-α和IL-6,呈明顯的量效和時效關系;③氯喹顯著增強6-FAM CpG ODN在單核細胞